理工大课件-常用临床病原检测 -2017.pptVIP

细菌鉴定 形态学检查 生物化学检查法 免疫学检查法 分子生物学检查法 生物学检查法 * 细菌鉴定 菌落大小 菌落颜色 溶血特点 产色素情况 气味 革兰染色镜检 真菌湿片镜检 抗酸染色镜检 墨汁染色 G-菌：氧化酶、OF 葡萄球菌属：触酶、凝固酶 b溶血链球菌：血清凝集试验 肠球菌属：高盐、胆七试验 形态学 菌落特征 生化鉴定 * * 1.形态学检查 一、观察细菌的培养特征来判断，观察内容包括：细菌培养物的颜色、气味、溶血性、菌落形态、细菌动力及在液体、半固体、固体培养基中的生长状态； 二、显微镜检查：借助各种显微镜可对细菌形态、基本结构、排列方式、数量、活体状态、运动特征等进行直观检查，对样本中细菌的含量和种类做出大致判断。 2.生物化学检查法 生物化学法又叫生化反应试验，它是利用各种不同细菌在进化中形成的独特的酶系统，在其生长环境中加入相应作用底物和指示剂，经培养一定时间后，细菌的代谢产物呈现肉眼可见或仪器可分析的变化，根据这些变化可对细菌的种类进行鉴别。 糖代谢试验； 蛋白质代谢试验； 碳源和氮源利用试验； 氧化酶、接触酶等单项检测试验。 * 对于工作经验很丰富的检验人员，双歧法也不失为一种简便而有效的细菌鉴定方法，这个方法所选用的测试特异性很好。 未知菌 + — + — + — 测试3 测试1 测试2 （1）双歧法：工作量大、工作效率低、准确性差、人为因素。 * （2）数值法：将细菌的形态和理化特征用数字表示，按照数学理论的方法将反应谱进行数字处理最后得出结果。 数值鉴定的流程 分离平板 鉴定结果 孵育 调配菌液 测试组合 分离平板 鉴定结果 孵育 调配菌液 测试组合 分离平板 鉴定结果 孵育 调配菌液 测试组合 * * 结果判读 查询编码 册或软件 * * 免疫学检查又叫血清学检查，它是利用抗体-抗原反应在细菌感染的种类、性质、部位及病人的感染程度进行特异性诊断，包括： 沉淀反应：可溶性抗原与相应抗体相混合，在一定条件下，形成肉眼可见的沉淀物 。应用于如链球菌、肺炎链球菌、鼠疫耶尔森菌的鉴定 凝集反应：颗粒性抗原与相应抗体可发生特异性结合，在一定条件下出现肉眼可见的凝集小块。用于沙门菌、志贺菌、致病性大肠埃希菌、霍乱弧菌、布氏杆菌、流感嗜血杆菌、脑膜炎奈瑟菌、肺炎链球菌及链球菌等的鉴定。 荚膜肿胀试验：常用于肺炎链球菌、流感嗜血杆菌和炭疽芽胞梭菌等检测。 制动试验：主要用于霍乱弧菌的快速鉴定。 3.免疫学检查法 * * 4.分子生物学检查法 应用分子生物学方法进行细菌检测，如部分的核酸杂交技术、聚合酶链反应技术（PCR）及质粒指纹图谱技术，还有逐渐成熟的蛋白质芯片技术及DNA芯片技术。 ---全自动细菌鉴定飞行质谱仪（简单介绍） 二、细菌耐药性检查 常用检测细菌耐药性的方法为： KB法（即纸片扩散法）：根据纸片中所含药物的抑菌环大小来判断。抑菌环越大越敏感。 优点：选药灵活、便宜、一个平皿可测多个药 缺点：影响因素多 MIC法：检测能够抑制被测菌生长的最低药物浓度，MIC值越小越敏感。 优点：操作容易（一次可操作检测多种药物）；敏感株的MIC呈正态分布；已实现自动化等 * 药敏试验折点的建立 1. MIC的分布 2. 药代动力学和药效学 定 MIC的折点 3. 临床疗效和细菌清除率 4. 抑菌圈直径的分布 …定抑菌圈折点 药代动力学和药效学 药代动力学：药物吸收，分布，代谢，排泄 药效学：药物对机体的作用 时间依赖型（％TMIC〕：β－内酰胺类，大环内酯类 浓度依赖型（AUC/MIC比率〕：AGS, FQ 这些参数可用于计算具有最佳药效的给药方案 * 选药原则 主要根据细菌种类和抗生素作用机制选药。选择试验的药物应具有确切的临床疗效，试验药物的体外试验结果可以接受，并且试验药物具有代表性。 预报用药 测试药 菌名 推测其它药物的敏感性 苯唑西林 葡萄球菌 所有β-内酰胺类 四环素 所有（除葡 多西环素，米诺环素 萄球菌和不 动杆菌〕 红霉素 G＋球菌 罗红霉素，克拉霉素，阿奇霉素 克林霉素 所有 林可霉素 测试药 菌名 推测其它药物的敏感性 氨苄西林 肠球菌 青霉素 青霉素G 葡萄球菌 氨苄，美洛，替卡 头孢噻吩 肠杆菌科 拉定，氨苄，克罗 万古霉素s 所有 替考拉宁s 奈啶酸 肠杆菌科 所有FQs 预报用药 报告结果方式 敏感（S）