氯沙坦钾对糖尿病肾病大鼠足细胞nephrin和podocin表达影响-effect of losartan potassium on expression of nephrin and podocin in diabetic nephropathy rats.docxVIP

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2018-07-27 发布于上海
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氯沙坦钾对糖尿病肾病大鼠足细胞nephrin和podocin表达影响-effect of losartan potassium on expression of nephrin and podocin in diabetic nephropathy rats

氯沙坦钾对糖尿病肾病大鼠足细胞Nephrin和Podocin表达的影响摘要目的：探讨氯沙坦钾对糖尿病肾病大鼠足细胞nephrin和podocin表达的影响及其对肾脏的保护作用机制。方法：将54只雄性Wistar清洁级大鼠，体重190—240g，随机分为3组：正常对照组（N组），糖尿病组（DM组），氯沙坦钾干预组（E组），每组18只。糖尿病组和氯沙坦钾干预组应用链脲佐菌素进行腹腔注射的方法建立糖尿病大鼠模型。成模一周后开始给药，E组大鼠给予氯沙坦钾50mg.kg-1d-1灌胃，其余两组给予等量蒸馏水灌胃。于实验的第4周、8周和12周各取6只大鼠，分别称重；尾尖取血测定血糖值；测定24h尿白蛋白排泄量；麻醉后腔静脉取血，测定血清胰岛素水平，并用全自动生化分析仪测定血清肌酐和尿素氮水平；用RT-PCR方法测定肾脏组织nephrin和podocinmRNA的表达；用免疫组化分析足细胞nephrin和podocin蛋白的表达；光镜下观察各组大鼠肾脏病理组织改变。结果：1.三组大鼠空腹血糖及血清胰岛素水平的比较：与正常对照组相比，DM组和E组大鼠空腹血糖明显升高，血清胰岛素水平明显降低，差异均有统计学意义（P0.05）。2.三组大鼠24h尿白蛋白排泄量、血清肌酐和血尿素氮的比较：与正常对照组相比较，DM组大鼠24h尿白蛋白排泄量明显增多（P0.05），而血肌酐和尿素氮无明显差别；与DM组相比，经氯沙坦钾干预治疗后，E组大鼠24h尿白蛋白排泄量逐渐减少（P0.05），血肌酐和尿素氮无明显差别。.三组大鼠肾脏足细胞nephrin和podocinmRNA表达的比较：与正常对照组相比，DM组和E组nephrin和podocinmRNA表达减少（P＜0.05）；与DM组相比，经氯沙坦钾治疗后，E组大鼠nephrin和podocinmRNA表达增加（P＜0.05）。.三组大鼠肾脏足细胞nephrin和podocin蛋白表达的比较：与正常对照组相比，DM组和E组nephrin和podocin蛋白表达减少（P＜0.05）；与DM组相比，经氯沙坦钾治疗后，E组nephrin和podocin蛋白表达增加（P＜0.05）。.糖尿病大鼠肾脏足细胞nephrin和podocin蛋白表达量与24h尿白蛋白排泄量表现为负相关。6.肾脏组织形态学观察：正常对照组大鼠肾小球、肾小管形态规则，无明显系膜基质增生。糖尿病组大鼠肾小球毛细血管基底膜增厚，系膜区基质大量沉积，肾小管上皮细胞空泡样变性，肾间质出现纤维化及单核细胞和淋巴样细胞浸润。经氯沙坦钾治疗后，E组大鼠上述病理变化均明显减轻，且随着时间的延长病变改善显著。结论：氯沙坦钾对糖尿病肾病大鼠肾脏的保护作用可能是通过上调nephrin和podocin表达水平来改善足细胞的功能，从而减少尿蛋白的产生。关键词：糖尿病肾病，足细胞，血管紧张素II受体拮抗剂TheeffectofLosartantotheexpressionofNephrinandPodocininPodocyteoftheDiabeticNephropathyRats.AbstractAbjective:Themainaimofthisstudywastoinvestigatetheexpressionofthenephrinandpodocininpodocyteofthediabeticnephropathy(DN)ratsandthemechanismoflosartan—inducedrenalprotection.Methods：54malecleanlevelwistarrats,weight190-240g,weredividedatrandomintonormalcontrolgroup(groupN),DMmodelgroup(groupDM)andlosartantreatmentgroup(groupE),eachgroupof18.DMmodelgroupandlosartantreatmentgroupwereinjectedtheSTZintointraperitonealtoestablishthemodelofdiabeticrat.Afteroneweekofsuccessionofthemodels,beginningtolavagetogroupEwithlosartan50mg.kg-1.d-1,thentheothertwogroupswiththesamevolumedistilledwater.After4,8and12weeksoftreatment,tomeasurethebloodglucoselevel,bodyweight,seruminsulin,serumcreatinine,bloodureanit