绵羊肺腺瘤病毒囊膜蛋白(jsrv-env)对大鼠的致瘤性的研究-study on the tumorigenicity of sheep pulmonary adenoma virus envelope protein ( jsrv - env ) in rats.docxVIP

目 录 1 引言 1 1.1 绵羊肺腺瘤概述 1 1.2 绵羊肺腺瘤病原学 1 1.3 OPA 的发病机理 2 1.4 绵羊肺腺瘤的流行病学 3 1.5 临床病理学 3 1.5.1 绵羊肺腺瘤的主要临床症状 3 1.5.2 临床病理学观察 4 1.5.3 病理组织学观察 4 1.5.4 血气分析技术 4 1.6 分子病理学 5 1.6.1 流式细胞术在绵羊肺腺瘤病中的应用 5 1.6.2 关于细胞免疫 5 1.6.3 关于细胞凋亡 5 1.6.4 肿瘤标志物 6 1.6.5 关于 K-ras、P53 基因 6 1.7 本研究的目的和意义 6 2 材料与方法 7 2.1 主要材料与试剂 7 2.1.1 实验动物 7 2.1.2 质粒 7 2.1.3 主要试剂 7 2.1.4 主要仪器 7 2.1.5 引物设计及合成 8 2.2 实验方法 8 2.2.1 质粒的提取与保存 8 2.2.2 实验动物的处理 9 2.2.3 检测 Env 表达 9 2.2.4 临床病理学方法检查 12 2.2.5 分子病理学方法检查 13 3 结果 15 3.1 PCDNA3.1-ENV 质粒的酶切鉴定 15 3.2 检测 ENV 表达结果 15 3.2.1 RT-PCR 检测 env 基因 mRNA 表达结果 15 3.2.2 免疫组化检测 Env 蛋白表达的结果 16 3.2.3 大鼠肺脏组织外源 env 基因 PCR 检测结果 16 3.3 临床病理学方法检查结果 17 3.3.1 血气分析结果 17 3.3.2 病理组织学检测结果 18 3.4 分子病理学方法检查结果 18 3.4.1 淋巴细胞及其亚群的检测结果 18 3.4.2 淋巴细胞凋亡的检测结果 19 3.4.3 肿瘤标志物的检测结果 20 3.4.4 基因突变的检测结果 20 4 讨论 22 4.1 ENV 蛋白表达结果分析 22 4.2 血气分析指标的变化分析 22 4.3 病理组织学检测结果分析 23 4.4 淋巴细胞及其亚群的变化分析 23 4.5 淋巴细胞凋亡情况的变化分析 23 4.6 肿瘤标志物的变化分析 24 4.7 基因突变检测分析 24 5 结论 24 致 谢 26 参 考 文 献 27 作 者 简 介 35 缩 略 语 表 OPA OPC SPA ovine pulmonary adenomatosis ovine pulmonary carcinoma sheep pulmonary adenomatosis 绵羊肺腺癌 绵羊肺癌 绵羊肺腺瘤 OIE office international des epizooties 世界动物卫生组织 GPI glyocsyl phosphatidyl inositol 糖基磷脂酰肌醇键 Hyal-2 hyaluronidase-2 透明质酸酶 2 ras rat sarcoma 大鼠肉瘤病毒基因 ctHb(est) Celluar Hb 血红蛋白含量 AG AnGap 阴离子隙 K+ Na+ Kaliumion concen tration Sodiumion concen tration K 离子浓度 Na 离子浓度 Cl- Chlorioneion concen tration Cl 离子浓度 FMC Flow cytometry method 流式细胞术 CEA Carcino-embryonic antigen 癌胚抗原 AFP Alpha-fetal protein 甲胎蛋白 PAGE polyacrylamide gel electrophoresis 聚丙烯凝胶电泳 PBS primer binding site 结合缓冲液 PCR polymerase chain reaction 聚合酶链式反应 PI Propidium Iodide 碘化丙啶 内蒙古农业 内蒙古农业大学硕士学位论文 PAGE 11 PAGE 10绵羊肺 PAGE 10 绵羊肺腺瘤病毒囊膜蛋白（JSRV-Env）对大鼠的致瘤性的研究 1 引言 1.1 绵羊肺腺瘤概述 绵羊肺腺癌（ovine pulmonary adenocarcinoma，OPA）是一种慢性、进行性、 接触传染性、主要侵害呼吸系统的疾病，同时它也是一种腺癌病，因此又称为绵羊 肺腺瘤病（sheep pulmonary adenomatosis， SPA），绵羊肺癌（ovine pulmonary carcinoma，OPC）或者叫“驱羊病”（Jaagsiekte） HYPERLINK \l _bookmark0 [1]。本病呈世界分布，目前大多 数养羊业发达的国家