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体外分析;体外分析技术是利用放射分析方法或其派生的相关非放射分析技术测定生物样品中微量生物活性物质含量的一类分析法。主要用于测定样品内的激素、抗原或抗体、受体容量、药物浓度以及其他生物活性物质。 ;体外分析技术;★放射分析方法或其派生的相关技术。 ★在体外进行机体内物质种类和含量的分析测定。 ★测定对象是患者血清、血浆或其他体液样品内的激素、抗原、抗体、药物浓度和其它生物活性物质等。 ★商品化试剂盒的应用（如北方所、原子高科）。;*;*;放射免疫分析 radioimmunoassay, RIA;一、RIA定义;二、RIA的基本原理;基本原理;三、RIA试剂盒组成;四、标准曲线的绘制;;B%;五、未知样品的测量;B%;六、操作基本步骤;RIA的优点;1.125I半衰期短（60天），试剂不稳定 2.反应时间长，操作难以自动化。 3.使用放射性核素，对人体有一定的危害性。 放射免疫分析有被取代的趋势。;非放射性标记免疫分析技术;一、酶标记免疫分析技术 用酶分子代替放射性核素标记抗原或抗体，进行竞争性或非竞争性免疫分析的技术。其中应用最多的就是酶联免疫吸附分析法（ELISA）。 它是结合了抗原抗体高特异性和酶促反应的高敏感性的检测技术。;操作步骤;*;*; 化学发光免疫分析技术是基于化学发光反应和免疫反应建立起来的免疫分析技术，它既具有免疫反应的高特异性，又具有化学发光的高敏感性。;1. 直接化学发光免疫分析法 是用能产生化学发光的化合物代替放射性标记物，其他步骤和RIA或IRMA基本相同。最常用的发光化合物是异鲁米诺和吖啶酯。它们在碱性条件下遇到过氧化物便发生单光子发射，光子的数量和异鲁米诺和吖啶酯的量成正比，而异鲁米诺和吖啶酯的量是反映复合物的量。 ★ 缺点：闪烁性发光，光信号不稳定。发光时间集中在加入过氧化物或碱的短时间内。 ;发光;化学发光标记免疫分析法;化学发光酶免疫分析（chemiluminescence enzyme 　immunoassay，CLEIA） 是用参与催化某一化学发光反应的酶如辣根过氧化物酶（HRP）或碱性磷酸酶(ALP)来标记抗原或抗体，形成抗体-待测抗原-酶标记抗体复合物，加入发光剂，酶催化和分解底物发光，计算机光电处理得出???体浓度数据;;化学发光酶免疫分析法;化学发光酶免疫分析法;3. 电化学发光免疫分析 （ECLI） 应用电化学发光的底物三联吡啶钌作为标记物，标 记方法是将其衍生物N-羟基琥珀酰胺（NHS）酯通过化学反应与抗体或不同化学结构的抗原分子结合，制成标记的抗体或抗原。ECLI的测定模式与ELISA相似，分两个布骤进行。以双抗体夹心法测定抗原为例，第一步在试管中进行，反应物为Ru(bpy)2+3标记的抗体、吸附在磁性微球上的固相抗体以及受检的标本。 ;;;电化学发光免疫测定示意图;标记磁颗粒在电场中发光工作示意图; ;ECLI检测流程图一（双抗体夹心的形成）;ECLI检测流程图二 （生物素与亲和素结合）;ECLI检测流程图三 磁珠吸引吸附于电极表面）;ECLI检测流程图四 （电极充电启动电化学反应）;ECLI检测流程图五 （撤消磁场冲洗磁珠）;试剂盒实样;优 点;电化学发光;三、时间分辨荧光免疫分析技术（time-resolved fluoroimmunoassay）;（一）标记物为具有独特荧光特性的稀土金属—镧系元素;（二）TrFIA的特点;AQT时间分辨荧光免疫测定仪 ; 甲状腺项目 肿瘤标志物 性激素类 糖尿病指标 心脏功能 贫血诊断指标 骨质疏松 其它项目 ;甲 状 腺 项 目 ;肿 瘤 标 志 物;性 激 素 类;心 脏 功 能;贫 血 诊 断 指 标;骨 质 疏 松;肿瘤标志物检测的基本原则;三、TM临床检测的基本原则;5.TM在肿瘤监测中的价值： TM的主要临床应用价值是判断肿瘤治疗疗效和复发监测。临床上可通过对肿瘤患者治疗前后及随访中TM浓度变化的监测，了解肿瘤治疗是否有效，并判断其预后，为进一步治疗提供参考依据。在患者治疗前应做相关TM检测。 6. TM浓度变化对肿瘤的疗效判断价值：恶性肿瘤治疗后TM浓度的变化与疗效之间有一定的相关系性，治疗后TM浓度变化，常有三种类型： （1）TM浓度下降到参考范围，提示肿瘤治疗有效。 （2）TM浓度下降但仍持续在参考范围以上，提示有肿瘤残留或肿瘤转移。 （3）TM浓度下降到参考范围一段时间后，又重新升高，提示肿瘤复发或转移。 ; 疗效观察可参照下列标准： 无效：TM浓度与治疗前相比下降﹤5