第六课题鱼卵的形态学-卵膜扫描电镜观察及遗传学鉴定的研究.pptVIP

鱼卵的形态学鉴别 鱼卵的形态学鉴别要点 鱼卵的形态学研究的特点 目前已鉴别的鱼卵仔稚鱼种类（Shao et al,2002） 卵膜扫描电镜观测 鱼卵卵膜受精孔的类型 鱼卵的遗传学鉴别研究 国外研究进展（简略） Mork et al.（1983）、Graves et al.（1988）分别用同工酶分析的方法来鉴别鱼卵与仔鱼。 Daniel Ⅲ and Graves（1994）用限制性酶切技术来鉴别春季产卵的石首鱼科的鱼卵。 Rocha-Olivares（1998）用扩增mtDNA特定区域的方法来鉴别岩礁鱼类的鱼卵与仔鱼。近年来，操作简便、结果直观的测序技术被广泛应用。 Shao et al. （2002）用mtDNA的D-loop基因片段序列来鉴别台湾海域的鱼卵，指出只有靠基因序列的比对才能将鱼卵准确鉴别到种。 Perez et al. （2005）用mtDNA中的16S rRNA序列来鉴别经福尔马林保存的Merluccius merluccius、Lepidorhombus boscii及L. whiffiagonis鱼卵。 García-Vázquez et al. （2006）利用16S rRNA为分子标记来鉴别资源调查时采集的不同种类的鱼卵。 Pegg et al.（2006）利用线粒体DNA条形编码来鉴别澳大利亚南部大堡礁海域的仔鱼。 沙氏下鱵鱼鱼卵的形态学遗传学鉴别研究 为了准确鉴别在南黄海海区（33°49′N, 122°10′E）利用浅水Ⅰ型浮游生物拖网采集的大量附着在海藻上的鱼卵种类，利用光学显微镜、扫描电镜和遗传学方法对其开展了综合鉴别研究。 其常栖息于浅海、河口，有时入淡水。主要分布在西北太平洋，从中国的长江口起，到黄海，渤海，日本海，日本太平洋沿岸一直延伸到库页岛以及符拉迪沃斯托克港湾附近。在黄渤海海域该鱼于5月下旬到6月上旬产卵，其与颌针鱼科鱼的产卵 期与产卵区相互交叠，卵的形态也特别的相似为黄渤海鱼卵常见种类 。 1.形态学观测（1）（4x10） 形态学观测（2）（4x10） 结论 2.鱼卵卵膜的扫描电镜观测（1） 鱼卵卵膜的扫描电镜观测（2） 3.鱼卵遗传学鉴别研究 实验引物 用于扩增D-loop基因的引物： L15623（5′-CCACCACTAGCTCCCAAAGC-3′） H16174（5′-GAACCTGACGAAGGAACCAGA-3′） 比对分析所用的序列种类、拉丁名、英文名、中文名、样品来源以及处理方法 基于Cyt b基因构建的鱼卵及同源序列和遗传距离图 2.鱼卵与沙氏下鱵鱼及太平洋颌针鱼COⅠ基因片段序列比对分析 基于COⅠ基因片段序列的遗传距离，NJ分子系统树、以及核苷酸组成 3.用D-loop片段序列的验证 结论 总结 鱼卵与沙氏下鱵鱼基于D-loop基因序列的平均遗传距离 遗传距离在0～0.7%之间，也为物种内水平的遗传分化。 小结： 鱼卵与沙氏下鱵鱼Cyt b与COⅠ基因片段序列间的遗传距离均为种内水平的遗传变异。而与颌针鱼科鱼类基因片段序列间的遗传距离。远远超过了物种水平差异。 且通过Cyt b与COⅠ基因片段序列的NJ分子系统树结果显示，鱼卵与沙氏下鱵鱼聚为一支，它们之间亲缘关系较近，而与颌针鱼科鱼类分聚为两支，它们之间亲缘关系较远。 用D-loop片段序列进行验证，得到了相同的结果。 遗传学结果显示鱼卵为沙氏下鱵鱼卵 * * * * * 鱼卵的形态学及遗传学鉴别的研究 张秀梅 高天翔 卞晓东 肖永双 2007.5.25 鱼卵鉴别的 重要意义 环境影响的评估 鱼类的增殖 渔业资源的解析 鱼类的放流 鱼 类 的 养 殖 海洋生态系统科学研究的基础工作 目的意义 鱼卵的鉴别的方法 (Shao et al.,2002) 研究背景 研究背景 19世纪，80～90年代渔业生产迅速发展（英国 HoltMintoch, 德国 Ehrorbaum，法国的 Guitel）开始鱼卵、仔鱼的种类鉴别。 二战后，因各国传统渔场普遍过渡捕捞，资源濒临枯竭，所以用鱼卵鱼、仔稚鱼的调查资料来估算鱼类资源量。（日本的水户敏，冲山宗雄。美国的Ahlstrom MatareseSandknop等）。 我国的学者在上世纪五、六十年代也对中国近海的主要鱼卵、仔鱼种类的形态学研究做了部分研究工作。(陈真然，张孝威，沙学绅，何桂芬，张仁斋等)。 迄今为止，绝大多数鱼卵种类的鉴定主要是依靠形态 学观察的方法，依据人工孵化或是连续观测的方法获得的图鉴和 检索表来进行鱼卵种类的鉴别。 研究背景 独立于胚胎的外部特征 鱼卵的形状、大小，卵壳的形状，卵黄的形状，油球的有无，以及围卵腔的大小，卵膜丝的有无。 与胚胎发育相关的特征 如色素的分布，肌节