金黄色葡萄球菌检验ppt课件_5.pptVIP

金黄色葡萄球菌检验;步骤：;固体样品：25g（电子天平） 液体样品：25mL（25mL吸量管） + 225mL生理盐水（量筒），混匀。 注意： 液体样品先用无菌NaOH或HCl调节PH至7.0。;增菌; 从阳性增菌液中用接种环取;平板划线示意图;菌落特征：金黄色，有时也为白色，大而凸起，圆形，不透明，表面光滑、湿润，周围有透明溶血圈。;从血平板或BP平板上挑取典型菌落，染色;血浆凝固酶试验; 涂片—— 火焰固定——结晶紫初染—— 水洗—— 碘液媒染—— 乙醇脱色—— 水洗—— 吸干—— 番红或沙黄复染—— 水洗—— 干燥—— 镜检;涂片：在载玻片中央滴一滴生理盐水，用无菌操作法挑取菌种于生理盐水中，调匀并涂成薄膜。注意：生理盐水不宜过多；涂片必须均匀。 火焰固定：载玻片通过火焰1 ~ 2 次固定，不可过热，以载玻片不烫手背为宜。 结晶紫初染：涂片置于水平位置。涂片薄膜上加结晶紫1滴，染色1min。 水洗：用自来水冲洗至冲下的水无色为止。;碘液媒染：加碘液媒染1min，然后用水冲洗至冲下的水呈无色为止。 乙醇脱色：用吸水纸将载玻片上的水吸净，用95%的乙醇滴于涂片薄膜上，滴洗至流出的乙醇不出现紫色为止，大约需要20 ~ 30s。立即用自来水冲洗乙醇约30s，用吸水纸吸干水分。;番红或沙黄复染：在涂片薄膜上滴加番红1滴，染色1 ~ 2 min。 水洗：用水冲洗至冲下的水呈无色为止。 干燥：于室温下自然干燥。 观察：干燥后，于涂片薄膜上滴香柏油1滴，置油镜下观察。 结果: 革兰氏阳性菌——紫色； 革兰氏阴性菌——红色。;革兰氏染色结果： G+（紫色，葡萄球状，无芽孢，无荚膜）;