缺血预适应通过beclin 1与bcl-2调控自噬对大鼠心肌缺血-再灌注损伤的保护作用-ischemic preconditioning regulates the protective effect of autophagy on myocardial ischemia-reperfusion injury in rats through be clin 1 and bcl - 2.docxVIP
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缺血预适应通过beclin 1与bcl-2调控自噬对大鼠心肌缺血-再灌注损伤的保护作用-ischemic preconditioning regulates the protective effect of autophagy on myocardial ischemia-reperfusion injury in rats through be clin 1 and bcl - 2
英文缩略语表及中文对照英文缩写英文全称中文全称IPCischemicpreconditioning缺血预适应I/Rischemia-reperfusion缺血再灌注WBWesternblotting免疫印迹法Co-IPCo-Immunoprecipitation免疫共沉淀CMAchaperone-mediatedautophagy分子伴侣介导的自噬AVsautophagicvacuoles自噬泡mTORmammaliantargetofrapamycin雷帕霉素靶位点CytCCytochromeC细胞色素CLC3microtubule-associatedprotein1lightchain3微管相关蛋白1轻链3LADtheLeftanteriordescendingcoronaryartery冠状动脉左前降支AARareaatrisk梗死区ATGAutophagy-relatedgen自噬相关基因ECDevolutionarilyconserveddomain进化保守区BHBc1-2homologyBc1-2同源结构域AIFapoptosisinducedfactor凋亡诱导因子FWOPfirstwindowofprotection第一保护时间窗SWOPsecondwindowofprotection第二保护时间窗TORCTORComplexmTOR复合物ERSendoplasmicreticulumstress内质网应激UPRunfoldedproteinresponse未折叠蛋白反应ROSreactiveoxygenspecies活性氧自由基NOnitricoxide一氧化氮AMPKadenosinemonophosphate-activatedproteinkinase腺苷一磷酸激活的蛋白激酶Bnip-3Bcl-2/adenovirusE1Bprotein-interactingprotein3Bcl-2/腺病毒E1B相互作用蛋白3HIFhypoxia-induciblefactor缺氧诱导因子mitoKATPmitochondrialATP-sensitivepotassiumchannel线粒体敏感钾通道ClassIPI3KclassIphosphatidylinositol3-kinaseI型磷脂酰肌醇3激酶Ш型磷脂酰肌醇3激ClassШPI3KclassШphosphatidylinositol3-kinase酶PIP3phosphatidylinositol-3,4,5-trisphosphate磷脂酰肌醇-3,4,5-三磷酸盐PDK1thephosphoinositide-dependentkinase1磷酸肌醇依赖性蛋白激酶1eEF2eukaryoticelongationfactor-2真核生物延长因子2缺血预适应通过Beclin1与Bcl-2调控自噬对大鼠心肌缺血-再灌注损伤的保护作用华中科技大学同济医学院协和医院综合科硕士研究生:刘艺导师:彭雯副教授中文摘要目的观察缺血预适应对在体大鼠急性心肌缺血再灌注损伤的保护作用及与自噬蛋白Beclin1与抗凋亡蛋白Bcl-2的可能关联,从而为缺血性心脏病的治疗提供新思路。方法雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠24只,重量200g-250g,随机平均分为假手术(Sham)组、缺血/再灌注(Ischemia-reperfusion,I/R)组、缺血预适应(IschemicPreconditioning,IPC)组。IPC组在缺血再灌注前给予短暂缺血5分钟、再灌注5分钟并循环3次,随后结扎30分钟,再灌120分钟。应用电子显微镜观察心肌细胞自噬泡的发生,线粒体的形态学改变;Westernblotting测定LC3-II和Beclin1蛋白的表达;免疫共沉淀(Co-Immunoprecipitation,Co-IP)检测Beclin1和Bcl-2蛋白的结合情况;TUNEL法检测细胞凋亡。结果与I/R组相比,IPC组自噬泡数量增多,线粒体超微结构损伤减轻。LC3-II作为评价自噬强度的指标,IPC与I/R组相比,该值上调(P<0.05)。I/R组与S组、IPC组相比,Beclin1与Bcl-2蛋白结合程度明显降低(P0.01);而这两组之间差异无显著性(P>0.05)。IPC组细胞凋亡率较I/R组明显降低(P0.01)。结论急性缺血再灌注可诱导心肌细胞自噬的发生,缺血预适应可通过促进Beclin1与Bcl-2的结合以减少再灌注阶段起损伤心肌作用的Beclin1依赖性过度自噬而减轻细胞损伤;并协同抗凋亡途径发挥心肌保护作用。【关键词】自噬;急性心肌缺血再灌注损伤;缺血预适应;Beclin1;Bcl-2ProtectiveEffectsofIschemicPrec
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