缺血再灌注脑损伤后蛇床子素的作用及机制分析-effect and mechanism analysis of osthole after ischemia-reperfusion injury.docxVIP

博 博 士 学 位 论 文 - - 缩略语表 缩略词 英文全称 中文全称 OST osthole 蛇床子素 eNOS endothelial nitric oxide synthase 内皮型一氧化氮合成 酶 MCAO middle cerebral artery occlusion 大脑中动脉阻塞 NDS neurological deficit score 神经功能缺陷评分 MDA malondialdehyde 丙二醛 GSH glutathione 谷胱甘肽 MPO myeloperoxidase 髓过氧化物酶 IL interleukin 白细胞介素 L-NAME NG-nitro-L-arginine methyl ester 左旋硝基精氨酸甲酯 NO nitric oxide 一氧化氮 TNF-α Tumor necrosis factor -α 肿瘤坏死因子-α NE Norepinephrine 去甲肾上腺素 PGE Prostaglandin E 前列腺素 E CAS Hydrocortisone 氢化可的松 TSH thyroid stimulating hormone 促甲状腺激素 PLA2 Phospholipase A2 磷脂酶 A2 AA Arachidonic acid 花生四烯酸 PLC Phospholipase C 磷脂酶 C HIF1 hypoxia inducible factor1 缺氧诱导因子 1 SOD Superoxide dismutase 超氧化物歧化酶 IP3 Inositol triphosphate 三磷酸肌醇 PIP2 Phosphatidyl inositol diphosphate 磷脂酰二磷酸肌醇 Glu Glutamate 谷氨酸 nNOS neuronal NO synthase 神经型一氧化氮合酶 iNOS inducible NO synthase 诱生型一氧化氮合酶 PPARs Peroxisome proliferator activated receptors  脂质过氧化物体增殖 物激活受体 RO S reactive oxygen species 活性氧 BWC Brain water content 脑含水量 CNS Central nervous system 中枢神经系统 COX Cyclooxygenase 环氧合酶 ATP adenosine triphosphate 三磷酸腺苷 SD Sprague Dawley 大鼠品系名称 缺血再灌注脑损伤后蛇床子素的作用及机制研究 中文摘要 缺血性脑血管病是中枢神经系统的常见病和多发病；位列十大致死疾 病前三、是首位致残因素，其发生率、病死率及致残率正在逐年上升。因 此，脑缺血再灌注的分子机制和治疗方法的研究是国内外学者的研究热点。 蛇床子素（osthole，OST）是香豆素类化合物的主要成分，来源于草本植物 蛇床子，自然资源十分丰富。近年来大量实验表明，OST具有抗炎、抗凝 血、扩张血管、抑制血栓形成、改善学习记忆、调血脂和潜在的神经保护 作用。本研究应用大鼠的脑缺血再灌注模型，观察OST对缺血性脑损伤的 保护作用，初步探讨OST保护作用可能的分子机制以及与内皮型一氧化氮 合成酶（endothelial nitric oxide synthase, eNOS）相关通路之间的关系。旨 在明确OST对缺血性脑损伤的神经保护作用及其可能的作用机制，为临床 应用OST治疗缺血性脑损伤提供理论基础。 实验一、缺血性脑损伤后OST预处理的保护作用 目的：观察缺血性脑损伤后 OST 的保护作用。方法：步骤一：建立大鼠大 脑中动脉阻塞（middle cerebral artery occlusion，MCAO）脑缺血再灌注模 型。步骤二：实验用 Sprague–Dawle（SD）大鼠 45 只随机分为假手术组 （Sham 组）、单纯缺血再灌注损伤组（MCAO 组）和不同剂量 OST 预处理 组（OST10+MCAO 组、OST20+MCAO 组、OST40+MCAO 组）；Sham 组 - - 动物仅接受手术，没有动脉夹闭的过程；MCAO 前 30min，对 OST 预处理 组动物分别腹腔注射 OST 10mg/kg、20mg/kg、40mg/kg。再灌注 24h 后， 采取双盲的形式对各实验组动物分别进行神经功能缺陷评分（neurological deficit score ， NDS ）。而后，每组随机选取 3 只动物用于伊红染色法 ( hematoxylin-eosin staining， HE 染色)观察缺血脑组织形态学变化；3 只用 于 2%红四氮唑(TTC)染色观察缺血