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第一组 徐玉秋、黄飞华、祁博、李诗赞、蔡东东、黄星星、杨孝刚 生物制药一班 指导教师：李先良 生物技术方法制备天然活性成分 传统方法 1 新兴提取技术 2 发展趋势和应用 3 传统方法 Personal Voice Communal Voice 水煎煮法 回流法 自动索氏提取法 索氏提取法 浸渍和渗漉法 各种传统方法的优缺点 回流法 易挥发的有机溶剂加热提取，则需采用回流法。 浸渍和渗漉法 水煎煮法 自动索氏提取法 浸渍和渗漉简单易行，一般在常温或温热条件下操作，适用于热不稳定成分的提取，但溶剂消耗量大，费时长，提取效果差； 水煎煮法是 我国最早使用的传统方法，大部分成分可被不同程度的煎出，但具有挥发性以及遇热易破坏的成分不宜用此法。 这是溶剂萃取中最常使用的方法，提取效率较高，但提取液受热时间长，热不稳定成分易分解。 近来发展的自动索氏提取，将高温渗漉与常规索氏提取相结合，溶剂用量比常规索氏提取少一半，且所需时间大幅度缩短。 索氏提取法 新兴提取技术 新兴提取技术 凝胶色谱技术 超临界流体萃取技术 高效液相色谱技术 超临界流体萃取技术 超临界流体分离过程的原理 超临界流体对脂肪酸、植物碱、醚类、酮类、甘油酯等具有特殊溶解作用，利用超临界流体的溶解能力与其密度的关系，即利用压力和温度对超临界流体溶解能力的影响而进行的。在超临界状态下，将超临界流体与待分离的物质接触，使其有选择性地把极性大小、沸点高低和分子量大小的成分依次萃取出来。 超临界流体CO2萃取与化学法萃取相比有以下突出的优点 可以在接近室温(35-40℃)及CO2气体笼罩下进行提取，有效地防止了热敏性物质的氧化和逸散； 全过程不用有机溶剂,因此萃取物绝无残留溶媒,同时也防止了提取过程对人体的毒害和对环境的污染,是100%的纯天然； 萃取和分离合二为一，当饱含溶解物的CO2-SCF流经分离器时，由于压力下降使得CO2与萃取物迅速成为两相（气液分离）而立即分开，萃取效率高而且能耗较少，节约成本； CO2是一种不活泼的气体,萃取过程不发生化学反应,且属于不燃性气体,无味、无臭、无毒，故安全性好； CO2价格便宜，纯度高，容易取得，且在生产过程中循环使用，从而降低成本； 压力和温度都可以成为调节萃取过程的参数。通过改变温度或压力达到萃取目的。压力固定，改变温度可将物质分离；反之温度固定，降低压力使萃取物分离，因此工艺简单易掌握，而且萃取速度快。 超临界流体萃取流程 SFE的基本流程是：由钢瓶提供高纯液体（CO2）经高压泵系统，流入保持在一定温度（高于Tc）下的萃取池。在萃取池中可溶于SCF的溶质扩散分配溶解在SCF中，并随SCF一起流出萃取池，经阻尼器减压获升温后进入收集器，多余的SCF排空或循环使用。 SFE的基本流程 凝胶色谱技术 分子量大的分子通过多孔凝胶颗粒的间 隙，路程短，流动快；分子量小的分子 穿过多孔凝胶颗粒内部，路程长，流动慢。 凝胶过滤色谱（GPC） 凝胶渗透色谱（GFC） 生物化学、分子生物学、生物工程学、分子免疫学、医学等相关领域 凝胶色谱的原理 凝胶色谱的分类 凝胶色谱的应用领域 凝胶色谱技术流程 泵 进样器 色谱柱 柱温箱 检测器 THF, 氯仿, DMF 示差检测器 凝胶渗透色谱装置 高效液相色谱的认识 高效液相色谱仪 高效液相色谱是色谱法的一个重要分支，以液体为流动相，采用高压输液系统，将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入装有固定相的色谱柱，在柱内各成分被分离后，进入检测器进行检测，从而实现对试样的分析。 1、吸附色谱 2、分配色谱 3、离子色谱 4、体积排阻色谱　 5、亲和色谱 主要类型 一 定义 二 LC98ⅡRI系列高效液相色谱仪（示差）GPC 高效液相色谱技术 高效液相色谱的适用范围 适宜于分离、分析高沸点、热稳定性差、有生理活性及相对分子量比较大的物质，因而广泛应用于核酸、肽类、内酯、稠环芳烃、高聚物、药物、人体代谢产物、表面活性剂，抗氧化剂、杀虫剂、除莠剂等物质的分析。 高效液相色谱的优点 只要求试样能制成溶液，而不需要气化，因此不受试样挥发性的限制。对于高沸点、热稳定性差、相对分子量大（大于400以上）的有机物原则上都可应用高效液相色谱法来进行分离、分析。据统计，在已知化合物中，能用气相色谱分析的约占20%，而能用液相色谱分析的约占70～80%。 随着生物技术的不断发展，越来越多的人接触到了生物技术并喜欢上这门学科。伴随着人们健康意识的不断提高，对生物来源的诸多生物活性物质重要性的认识也不断提高，人们回归自然界的呼声逐渐强烈，从天然资源中寻找新药或者其他生活用品变得热门起来。并且与我们的生活息息相关，如生病了吃的药，人们用的化妆品等等，因此生物技术