聊城大学农学院动物免疫学ppt课件第十六章 免疫标记技术.pptVIP

主讲：路建彪;1. 免疫技术是利用Ag-Ab反应进行的检测方法，特点是具有高度的特异性和敏感性。 2. 如将Ag或Ab用标记物(如荧光素、酶、放射性同位素等)进行标记，则在与标本中的相应Ab或Ag反应后，可以不必测定Ag-Ab复合物本身，而测定复合物中的标记物，通过标记物的放大作用，进一步提高了免疫技术的敏感性。; 　　 ;第一节 荧光抗体技术 （fluorescent antibody technique）;一、荧光现象与荧光物质 ;荧光分子的辐射能力在受到激发光较长时间的照射后会减弱甚至猝灭； 这是由于激发态分子的电子不能回复到基态; 所吸收的能量无法以荧光的形式发射。;许多物质都可产生荧光现象，但并非都可用作荧光色素。 只有那些能产生明显荧光并能作为染料使用的有机化合物才能用作免疫荧光色素或荧光染料。;;性质稳定，可长期保存； 最大吸收光波长为 570nm； 最大发射光波长为595～600nm； 呈现橘红色荧光。;最大吸收光波长为 550nm， 最大发射光波长为620nm， 呈现橙红色荧光， 与FITC的翠绿色荧光对比鲜明， 可配合用于双重标记或对比染色。;二、抗体的荧光素标记;（1）应具有能与Ab分子形成共价健的化学基团； （2）与蛋白质结合后，仍能保持较高的荧光效率； （3）荧光色泽与背景组织的色泽对比鲜明； （4）与Ab结合后不影响Ab的生化与免疫性质； （5