山仙颗粒含药血清对s180细胞细胞fasfasl基因表达的相关性分析fasfasl基因表达影响的实验分析-correlation analysis of fasfa sl gene expression in s180 cells by serum containing shanxian granules experimental analysis of fasfa sl gene expression.docxVIP

中文摘要目的：本实验旨在探讨SD大鼠山仙颗粒(SXG)含药血清对体外培养的s180细胞肿瘤相关基因fas和fasl表达水平的影响,以探讨其抗肿瘤发生和发展的机理。方法：将体外培养扩增的s180细胞制备成5×105·mL-1细胞悬液,将其置入不同浓度的SD大鼠山仙颗粒含药血清及SD大鼠正常血清中,分成对照组(90%1640培养液、10%小牛血清)、空白血清1组(90%1640培养液、1%SD大鼠正常血清、9%小牛血清)、空白血清2组(90%1640培养液、10%SD大鼠正常血清)、含药血清1组（90%1640培养液、1%SD大鼠山仙颗粒含药血清、9%小牛血清)和含药血清2组(90%1640培养液、10%SD大鼠山仙颗粒含药血清),每组设3个复孔；分别培养24h、48h、72h后，收集细胞制成细胞涂片；免疫细胞化学(SP法)及免疫荧光法检测s180细胞中fas及fasl?基因的表达情况，并对照分析。实验各组数据用均数±标准差(x±S)表示，采用SPSS13.0统计学软件进行统计学分析，各组间比较采用单因素方差分析，以P＜0.05为有显著差异，具有统计学意义。结果：1、各时间段的对照组、含药血清1组及空白血清1组比较，各组间s180细胞fas基因及fasl基因表达水平无显著差异(P0.05)；各时间段对照组、含药血清2组及空白血清2组比较，对照组和空白血清2组s180细胞fas基因及fasl基因表达水平无显著差异(P0.05)，而含药血清2组较对照组及空白血清2组的s180细胞fas基因表达水平升高而fasl基因表达水平下降(P0.05)。2、含药血清2组各时间段比较，s180细胞fas基因表达水平48h及72h较24h的表达水平升高(P0.05)，而48h与72h比较无显著差异(P0.05)；s180细胞fasl基因表达水平各时间段无显著差异(P0.05)。结论：SD大鼠山仙颗粒含药血清大剂量组能显著使体外培养的s180细胞的fas基因表达升高而fasl基因表达下降,该实验结果表明山仙颗粒可能是通过改变fas和fasl的表达水平从而发挥其诱导肿瘤细胞凋亡及免疫调节作用来抑制肿瘤的生长、转移及复发。关键词：山仙颗粒、s180细胞、fas/fasl、免疫细胞化学、免疫荧光法。StudyontheExperimentoftheInfluenceofShanXianGraintheSerumContainingSDonS180Genesfas/faslCellExpressionAbstractObjective：ThisstudyistoexploretheinhibitionoftheserumcontainingSDratsSXGinthes180cellsinvitro，theexpressionoffas/faslgenesrelatedtothetumor,andthemechanismoftheanti-tumoroccurrenceanddevelopment.Method：First,s180cellsexpandedinvitrocellculturearepreparedinto5×105?mL-1cellsuspension,whichisputintotheserumcontainingSDratSXGofdifferentconcentrationsandtheSDratnormalserum.Second,herecomethefollowinggroupstobedivided:contrastgroup(90%1640medium,10%bovineserum),blankgroup1(90%1640medium,1%SDratnormalserum,9%bovineserum),blankgroup2(90%1640medium,10%SDratnormalserum),serumcontaininggroup1(90%1640medium,1%serumcontainingSDratsSXG,9%bovineserum)andserumcontaininggroup2(90%1640medium,10%serumcontainingSDratsSXG).Third,eachgrouphasthreemultipleholestocollectcellsafter24h,48h,72h,andmakethecellsintosmear.Last,theexpressionoffasandFaslgenesintumorcellsisdetectedthroughimmunocytochemistry(SPmethods)andimmunofluorescencemethods，contributingt