膳食铁补充对心理应激大鼠血糖水平的影响及其机制分析-effect of dietary iron supplementation on blood glucose level in psychological stress rats and its mechanism analysis.docxVIP

膳食铁 膳食铁补充对心理应激大鼠血糖水平的影响及其机制研究 第二军 第二军医大学硕士学位论文 - - PAGE 13 - - - PAGE 10 - 摘 要 近年来，铁过负荷问题备受关注，由于各种原因造成的机体铁过量，导致的氧化 应激损伤，在神经退行性疾病、冠心病等常见疾病的发生发展中起到重要作用。国内 外研究还发现，体内铁过负荷与胰岛素抵抗及糖尿病的发生发展之间也存在某些联 系。 人群调查发现血清铁蛋白（SF）升高与胰岛素含量及血糖水平呈正相关，提示 铁负荷增加可能与糖尿病风险升高有联系；动物实验也证实给小鼠腹腔注射三乙酸铁 可导致其胰岛 β 细胞和肝细胞的铁沉积：胰腺铁沉积可造成胰岛 β 细胞凋亡、胰岛素 分泌水平下降；肝铁沉积可导致肝细胞胰岛素抵抗。上述影响的结果均会使得血糖水 平明显升高。 然而，近年来有研究者认为，机体铁营养状况与糖尿病的发生发展之间无必然联 系。还有学者提出，只有血红素铁的过度摄入会增加患糖尿病的风险。关于这方面的 研究尚无定论。 随着现代社会科技的进步以及生活节奏的加快，人们经常处于应激状态，像军人 由于保家卫国的需要，经常要面对突发性事件，如战争爆发，执行特种任务等，这些 特殊情况和特种作业条件都容易诱发军人应激反应。众所周知，机体应激时激素的分 泌，例如糖皮质激素、儿茶酚胺类激素、胰高血糖素水平大幅度的升高和胰岛素分泌 的减少，均会导致血糖水平升高。应激所诱发的应激性高血糖是糖尿病的诱因之一。 因此，预防应激时血糖水平的过度升高对保障应激人群的健康具有重要意义。 现实生活中，铁的补充常常作为预防缺铁性贫血、低出生体重等营养缺乏病的有 效策略而存在。而且我们的预实验发现，膳食铁的补充会引起应激大鼠血糖水平显著 且持续的升高。所以了解膳食铁的补充对血糖尤其是应激血糖的影响，对保障应激人 群的健康均具有积极意义。本文为阐明这些问题进行了系统研究。 研 究 目 的 了解膳食铁补充与血糖的关系，初步探讨血糖水平变化的原因，为经常处于应激 状态的人群（如军人、运动员等）膳食铁供给量的制定提供实验依据 方 法 一、 心理应激模型的制作 利用 Communication box system，制作大鼠心理应激模型。Communication box system 是由透明丙烯酸板构成，由 A、B 小室间隔组成。A 室铺绝缘胶管，B 室通电。 在 B 室的大鼠接受 30min/d 的足底电击（电压 80V），跳跃尖叫；A 室的大鼠通过视 觉和听觉等产生恐惧的心理应激。通过 ELISA 和 RIA 的方法检测大鼠血清 CORT、 ACTH、NE 和 EPI 的水平来判定心理应激模型的建立成功与否。（Communication box system 具体装置如下图） B A 二、膳食铁的补充对心理应激大鼠血糖水平的影响 （一）膳食铁含量的设定 膳食铁含量为 80mg/kg 的饲料作为正常铁饲料（参考文献）；膳食铁含量加倍作 为 膳 食 中 铁 组 （ 160mg/kg ）； 在 此 基 础 上 ， 铁 含 量 再 次 翻 倍 作 为 膳 食 高 铁 组 （320mg/kg）。 （二）实验动物及分组： 大鼠接受心理应激暴露一周，膳食铁的补充对应激大鼠血糖水平的影响：60 只 雄性 SD 大鼠 (购自上海西普尔-必凯公司)，体重（120±5）g。适应性喂养 7 天，期 间喂饲铁含量为 80mg/kg 的饲料。随后将各组大鼠按体重随机分为 6 组，分别为正 常铁对照组（NC），正常铁+心理应激组（NP），中铁对照组（MC），中铁+心理应激 组（MP），高铁对照组（HC），高铁+心理应激组（HP），每组 8 只。其余作为电击 组。动物饲养在清洁级动物房，环境温度为 24℃±1℃，相对湿度为 40%～60%。全 部单笼饲养，自由饮食及去离子水。12h/12h 自然昼夜节律变化光照。 大鼠接受心理应激暴露两周，同时补充膳食高铁，两周内应激大鼠血糖水平的改 变： 32 只雄性 SD 大鼠，体重（120±5）g，用 80mg/kg 的含铁饲料适应性喂养 7 天 后，随机分为四组，分别为正常铁对照组（NC），正常铁应激组 （NP），高铁对照 组（HC）和高铁应激组（HP）。实验时间为两周。 （三）实验大鼠的处理 一周组：正常铁对照、中铁对照、高铁对照三组分别喂饲膳食铁含量为 80、160、 320mg/kg 的饲料；正常铁应激，中铁应激，高铁应激三组在喂饲相应膳食铁饲料的 基础上，接受心理应激暴露。连续实验处理 7 天。 两周组：正常铁对照组喂饲铁含量为 80mg/kg 的饲料，高铁组喂饲 320mg/kg 的饲料，心理应激模型的制作方法同上。连续实验处理 14 天。 （四）大鼠体重以及饲料消耗量的测定 电子天平称量大鼠