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注：以下翻译仅供参考，最终使用者请以英文原文说明书为准！ D-荧光素体外操作手册 介绍 荧光素是一种常用的荧光素酶表达的活体成像生物发光报告子。以ATP 和Mg2+作为辅因 子，有氧条件下荧火虫荧光素酶与水溶性底物反应发出一种特有的黄绿色发射光，在 37℃ 活体内转换为红光。该反应通过消耗ATP 来指示是否存在能量或生命的存在。 由于萤火虫荧光素酶的超灵敏性，快速和易于使用的体系，在研究基因表达方面萤火虫荧 光素酶是最常用的报告基因之一。荧光素酶被用来监测细菌，培养细胞和转基因植物或动物 的启动子活性反应。荧光素酶是一个 61kDa 大小的蛋白，它的活性形式是单体，且不需要 其它的加工修饰。通过催化荧光素的氧化羧化作用，萤火虫荧光素酶会产生已知的生物发光 中最高效的反应之一。荧光素酶活性用来描述与启动子/增强子元件相联的基因调控。通过 优化，化学发光反应产生的光和调控元件的转录活性之间存在直接相关性。 对于体外报告系统荧光素酶活性的检测，此手册将提供一个简单的，经济可靠的方法。 生物发光反应 几个因素将会影响反应的灵敏度，包括温度，pH 或底物浓度。为得到最佳结果，在使用 之前我们建议用pH7.8 的缓冲液，并且所有试剂在室温下预热。为充分反应，我们建议