肾移植受者ugt1a9 ugt1a8 ugt2b7 abcc2 abcg2和slco1b3基因多态性与霉酚酸酯所致不良反应的相关性研究-association between polymorphism of ugt1a9 ugt18a8 ugt2b7abc c2ab cg2 and slco3 genes and adverse reactions caused by mycophenolate mofetil in renal trans.docx

目录摘要IABSTRACTVI中英文缩略词表XIII前言1第一章肾移植术后霉酚酸酯相关不良反应的危险因素研究71.研究对象与材料72.实验方法93.实验结果104.讨论12第二章HPLC-荧光法测定肾移植受者血浆中霉酚酸的浓度155.研究对象与材料156.实验方法167.实验结果208.讨论20第三章UGT基因多态性与肾移植患者术后霉酚酸酯所致不良反应的相关性研究231.研究对象与材料242.实验方法243.实验结果294.讨论50第四章ABCC2基因多态性与肾移植患者术后霉酚酸酯所致不良反应的相关性研究551.研究对象与材料552.实验方法563.实验结果574.讨论66第五章ABCG2、SLCO1B3基因多态性与肾移植患者术后霉酚酸酯所致不良反应的相关性研究691.研究对象与材料702.实验方法703.实验结果724.讨论80全文总结83参考文献87综述97攻读学位期间发表论文108致谢109摘要肾移植受者UGT1A9、UGT1A8、UGT2B7、ABCC2、ABCG2和SLCO1B3基因多态性与霉酚酸酯所致不良反应的相关性研究背景器官移植已成为终末期肾衰竭有效的临床治疗手段，移植受者的长期存活率和生活质量已成为广泛关注的问题。器官移植术后的排斥反应是影响移植受者术后生活质量的重要因素，也是术后患者使用免疫抑制药的主要原因，严重的排斥反应会导致移植失败。因此，实现免疫抑制药的个体化用药，不断提高器官移植受者的存活率，成为现阶段器官移植领域研究的热点问题。霉酚酸酯（Mycophenolatemofetil，MMF）属雷帕霉素靶分子抑制剂，因其免疫抑制效果好，不良反应发生率较低，在临床获得广泛使用。但其显著的个体代谢差异和狭窄的治疗窗也是临床应用中的两个重要影响因素。治疗药物监测（Therapeuticdrugmonitoring，TDM）是现阶段临床使用最为常见的药物浓度监测手段，然而TDM不足以提供全面的解决方案，因为在较低或者标准剂量下依然发现了毒副作用的存在。因免疫抑制药需长期甚至终身服用，就患者而言，在得到良好疗效的同时也需要考虑到经济承受能力。因此，如果能够从遗传的角度，建立免疫抑制剂的个体化用药模型，在用药前就对患者进行初始剂量和常用剂量的预测，可在一定程度上降低不良反应，使得霉酚酸酯更加安全、有效、经济地得到利用。在众多影响药物吸收、分布和代谢的因素当中，遗传差异是最具有个体代表性的因素。研究表明，百分之二十到百分之九十的药物代谢与患者遗传特性有关。因此，药物基因组学的研究对临床用药的指导具有重要意义，现阶段国内外对霉酚酸酯的基因多态性研究主要集中在尿苷二磷酸葡萄糖醛酸转移酶(UDP-glucuronosyhtransferase，UGT)、多药耐药结合蛋白-2（Multidrugresistance-associatedprotein2，MRP2)、有机阴离子转运多肽1B3（organicaniontransportingpolypeptide1B3，OATP1B3）上。其I中，UGT1A9-440CT、UGT1A9I399CT、UGT1A8*2、UGT2B7G211T、UGT2B7A268G基因多态性，编码MRP2的基因ABCC2-24CT、ABCC21249GA、ABCG2C421A基因多态性，SLCO1B3T334G位点的多态性与霉酚酸酯血药浓度密切相关。最新研究发现，OATP1B3可通过调节孕烷X受体（PregnaneXreceptor，PXR）和组成性雄甾烷受体（Constitutiveandrostanereceptor，CAR）的转运，间接影响人体PXR和CAR的蛋白表达水平，进而影响某些药物代谢关键酶的表达，而这类酶的遗传特性个体差异较大。以上基因多态性对霉酚酸酯的药动学具有十分重要的影响，弄清楚各基因位点突变对霉酚酸酯药动学的影响，是实现霉酚酸酯个体化用药的重要手段。现阶段国内外的研究主要是讨论相关基因位点的多态性与MMF血药谷浓度的关系，尚没有对相关位点的基因多态性与MMF所致相关不良反应的关系进行深入研究。目的通过测定服用霉酚酸酯的肾移植受者UGT1A9、UGT1A8、UGT2B7、ABCC2、ABCG2以及SLCO1B3基因多态性，研究转运酶、多药耐药相关蛋白以及其他基因多态性是否与霉酚酸酯所致不良反应存在相关性，为肾脏移植受者霉酚酸酯的临床个体化用药提供参考。方法采用PCR-RFLP(聚合酶链反应-限制性片段长度多态性)技术对236名肾移植患者进行以下基因位点：UGT1A9-440CT、UGT1A9I399CT、UGT1A8*2、UGT2B7G211T、UGT2B7A268G、ABCC2-24CT、ABCC21249GA、ABCG2C421A、SLCO1B3T334G多态性的检测。将