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用高效液相色谱法测定小儿速效感冒冲剂中对乙酰氨基酚的含量ppt课件
用高效液相色谱法测定小儿速效感冒冲剂中对乙酰氨基酚的含量
1 HPLC方法概述
2 仪器操作
3 数据处理
高效液相色谱实验室 ;【分离】;分离原理:基于试样中各组分在固定相和流动相间平衡分配的差异而达到分离的目的。
定性依据:保留时间的相对性,通常相对误差不能超过5%。
定量参数:常采用峰高、峰面积、相对峰高、相对峰面积。
定量的方法:(1)面积归一化法 (2)内标法 (3)外标法 ;外标法也称标准曲线法。配制一系列对乙酰氨基酚标准溶液进行色谱分析,在严格一致的条件下,由所测定的峰面积对应浓度作图,得到标准曲线,再根据试样中的对乙酰氨基酚面积,由标准曲线算出其浓度。; 高效液相色谱仪的结构一般可分为4个主要部分:
高压输液系统,
进样系统,
分离系统,
检测系统。
此外还配有辅助装置:如梯度淋洗,自动进样及数据处理等。;Date;高效液相色谱仪1;高效液相色谱仪2;高效液相色谱仪3;高效液相色谱仪4;1. 流动相(洗脱液)
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8. 高效液相色谱柱
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10. 在线脱气机;用高效液相色谱法测定小儿速效感冒冲剂中对乙酰氨基酚的含量 ;【试剂】
甲醇(色谱纯)
水为高纯水
外标标准样,对乙酰氨基酚(中国药品生物制品检定所)的甲醇溶液系列。配制方法:精密称取在105 ℃干燥至恒重的对乙酰氨基酚对照品25 mg ,置25 ml 量瓶中,用甲醇溶解并稀释至刻度,摇匀,备用。
待测样品:小儿速效感冒冲剂,称取一定量的药品,研细,精密称取适量(约相当于对乙酰氨基酚12 mg) ,置50 ml 量瓶中,加甲醇35 ml ,超声10 min ,取出,放置至室温,用甲醇稀释至刻度,摇匀,滤过,再经0. 45μm 微孔滤膜滤过,即得。;【实验条件】;【实验步骤】;【实验步骤】;【实验步骤】;关好仪器要求:
1、实验完毕及时关闭检测器(便于保护检测器,甚至可延长检测器的寿命);
2、冲洗进样阀:将进样针插入进样器,先用流动相或样???的溶剂,3~5次,再用甲醇冲洗,3~5次;再旋动进样阀按上法冲洗,3~5次;最后把进样器上的进样针拔掉,安上配备的冲洗头(白色的圆形配件)用甲醇冲洗3~5次,即可。将进样针插到进样器上保存,盖好红色保护盖;
3 、冲洗色谱柱:先用流动相冲洗约10~15分钟,再用含5%甲醇的水冲洗10~20分钟。最后用高浓度甲醇(含甲醇85%以上)溶液或纯甲醇冲洗,时间约20~30分钟;
4、关机,根据提示依次关闭桌面,最后关闭工作站、恒流泵。 ;【数据记录及处理】;2、处理色谱数据 ;3、绘制乙酰氨基酚峰面积-质量浓度标准曲线,计算回归方程和相关系数。
4、根据试样溶液中的乙酰氨基酚面积值,由标准曲线计算出小儿速效感冒冲剂中乙酰氨基酚的质量分数 ;【思考题】;实验步骤小结
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