基础分子生物学第五ppt课件.ppt

DNA的脉冲电泳技术（PFGE — pulse-field gel electrophoresis） 如果因某个G残基的甲基化作用而阻止了蛋白质与DNA的结合，那么，六氢吡啶对这个甲基化G残基的切割作用，就只能在没有蛋白质结合的DNA中观察到。 （4）差别分析法 (RDA法，即 Representational difference analysis）； （5）酵母双杂交体系Two-hybrid system； （6）图位克隆法（map-based cloning）与染色体步移 （genomic DNA Walking）。 主要步骤： ①????????? 用32P标记DNA双链末端，并用RE切去一端； ②????????? 加入细胞特定周期蛋白质提取物，温育； ③????????? 加入适量DNaseI或硫酸二甲酯—六氢吡啶，使DNA链发生断裂。 这一反应中，DNaseI或硫酸二甲酯的用量非常关键，要保证一条链只发生一次断裂！ * * 3.你能用什么样的实验证明模板mRNA只能识别tRNA而不是氨基酸？ 4.已知大肠杆菌DNA总量为4.4x106bp, Cot1/2=9, 有一生物，其Cot1/2=3x10-1，求其细胞中的DNA总量。 三、问答题 1 .说说DNA组装成染色体的主要过程。 2 .写出肽链合成起始、延伸和终止三个阶段的主要步骤和主要因子。 19