转录后加工及RNA编辑.ppt

RNA的转录后加工及RNA编辑 RNA的转录后加工 极少数的转录产物直接成为成熟的RNA分子 RNA加工是生物中普遍存在的现象 RNA加工的类型多种多样，不同生物、不同种类的RNA转录后进行的加工方式不同 一、 RNA加工（RNA Processing） 前体RNA转变为成熟RNA的过程 主要的加工方式 核苷酸的切除（Removal of nucleotides） 末端添加核苷酸（Addition of nucleotides） 碱基或糖苷的修饰（Modification of certain nucleotides ） 1 核苷酸的切除 核酸内切酶（endonucleases）： 　在前体RNA内部特定位点切割 核酸外切酶（exonucleases）： 　在前体RNA末端逐个剪切核苷酸 此加工方式普遍存在于真核生物和原核生物 2 核苷酸的添加 1) 5’Capping m7G 2) 3’Tailing poly(A) 二、原核生物中RNA的转录后加工 1、原核生物rRNA前体的加工 2、 真核生物的tRNA加工 酵母tRNATyr加工为例 ①转录产物前体具有特征 茎环结构的二级结构 ②RNAaseP D内切酶识别 二级结构，并切除5’端16nt 前导区和3’ 端额外的2nt 真核生物和原核生物tRNA加工的差异? 3、真核生物mRNA前体的一般加工 核内不均一RNA(hnRNA):mRNA的原初转录物是分子质量极大的前体，在核内加工过程中形成分子大小不等的中间物，称为核内不均一RNA。 hnRNA能部分的转变为成熟mRNA hnRNA与特定蛋白结合形成hnRNP。 这些蛋白被分为A—U类，其中A、B、C最丰富 hnRNP蛋白:有助于保持hnRNA的单链状态，辅助各种RNA加工反应 pre-mRNAs are not exported until processing is complete, hnRNPs are found only in the nucleus. 大多数snRNA由RNA pol II转录，与特定蛋白形成snRNP，存在与细胞核中 snRNA富含U，因此命名为U1、U2…… snRNP参与前体mRNA剪接、前体rRNA加工中甲基化位点的确定 主要的核质snRNP由单一的snRNA和一组8个碱性蛋白及多种snRNP特定蛋白组成。 pre-mRNA转变为成熟mRNA的过程 ①5’端形成特殊的帽子结构(m7G5’ppp5’NmpNp) ②在3’端切断并加上多聚腺苷酸（polyA）尾巴， ③通过剪接反应将内含子转录来的序列切除并将外显子序列连接起来；　 ④链内部核苷被甲基化。 加尾过程 ① 特定的蛋白因子识别信号序列后，结合前体mRNA上，组装成复合体 ②内切酶CF (cleavage factor)在AAUAAA下游11～20 nt 的特定位点对前体mRNA进行剪切; ③聚腺苷酸聚合酶PAP在3’端添加多至250个A残基 ④ PABP 结合到poly(A) ①5’端有5’-GU-3’序列； ②3’端有5’-AG-3’序列； 在果蝇中，一个类似的机制用来控制P因子转座酶的合成。 转座酶基因含三个内含子，在生殖细胞中产生成熟的编码转座酶的转录本，然而在其他组织中，第三个含终止密码子的内含子被保留，使转座酶蛋白截短，从而阻止体细胞中P因子的转座。 如哺乳动物GABAA受体E亚基的mRNA前体除了脑以外其他组织都不剪接。 可选择性剪接 剪接位点的选择具有可塑性 The gene of the m heavy chain of the mouse IgM immunoglobulin: Alternative splicing for cell-type specific expression of mRNAs 几种真核生物的可变剪接 RNA Editing 定义：原始转录产物的序列发生改变 在mRNA水平上发生信息变化的过程 导致成熟的RNA（主要是mRNA）编码序列和它的转录模板DNA序列之间不相匹配。RNA编辑的效果是改变RNA的编辑能力，使它编码不同于原基因编码的多肽链。 编辑的方式:碱基的改变和 碱基的插入或缺失 编辑通常沿mRNA的3’端向5’端方向进行。 RNA编辑是在编辑体中完成的。 人载脂蛋白mRNA（apolipoprotein B）基因编码4563个AA多肽→Apo Bl00 ——肝细胞中合成后分泌到血液中 编码2153个AA多肽→Apo B48 ——在肠细胞中合成 同源载脂蛋白 是载脂蛋白mRNA编辑后的产物