乙肝两对半5课件.pptVIP

ELISA-2 （乙肝两对半的检测）;【目的要求】; ;【器材】;【试剂】;【标本】;准备：试剂盒各组份在37℃平衡30min； 配洗涤液：用纯化水按1:25将浓缩洗液稀释； 加样品：每孔加入待测样品75ul/孔，同时设置阳性对照、阴性对照，空白对照（不加样品），轻轻振荡混匀； 孵育：贴上封膜，37℃反应60min; 加酶结合物：每孔加入50ul/孔（空白对照不加），震荡10秒钟；;孵育：贴上封膜，37 ℃反应30min; 洗板：洗板机5次，最后一次尽量扣干； 显色：先加显色液A 50ul，再加入显色液B 50ul，贴上封膜，37℃反应30min(避光)； （注：显色从加入第一滴显色液B开始计时） 终止：加终止液50ul； 判读：终止反应后10min内完成。(450nm处测定吸光度)。;结果判断及解释 COV=2.1×OD阴性对照 阳性：OD样品≥COV 阴性：OD样品＜COV 检测有效性 OD阴性对照≤0.10， OD阳性对照≥1.0 OD空白对照≤0.04（双波长检测） ;准备：试剂盒各组份在37℃平衡30min； 配洗涤液：用纯化水按1:25将浓缩洗液稀释； 加样品：每孔加50ul，同时设阳性对照、阴性对照和空白对照（不加样品）； 加酶结合物：每孔50ul（空白对照不加）； 孵育：贴上封膜，37 ℃反应30min；;洗板：洗板机5次，每次洗液在孔中滞留时间10-15s