产品无菌检测实操简介提纲100218.pptVIP

* * * * * * *  * * 微生物限度试验用培养基的灭菌：121℃灭菌20分钟。 * * * * 膜材料：玻璃纤维、醋酸纤维、 * 固体样品： 直接放入液体培养基中，如注册器、缝合线、针头、人工关节等； 如果太大，可剪碎、切断后直接培养； 或用无菌的液体（生理盐水、蛋白胨培养基等）洗涤后，过滤浓缩，培养滤膜； 粉末：应注意是否能在培养基中溶解，否则，可能影响结果的判定。 * 如果样品表面有活性剂、中和剂或灭活剂，应证明其有效性及对微生物的生长无影响。 * 如在加入供试品后、或在培养过程中，培养基出现浑浊，培养 14天后，不能从外观上判断有无菌生长，可取该培养液适量转种至同种新鲜培养基中及营养琼脂斜面和改良马丁琼脂斜面培养基上，细菌培养 2天、真菌培养 3天，观察接种的同种新鲜培养基及营养琼脂和改良马丁琼脂斜面培养基上是否有菌生长；或取培养液（物）涂片，染色，镜检，判断是否有菌，必要时作菌种鉴定。 * * * * 抽样数量略有增加。 * * * 四、结果判定 判定方法 逐日观看任何一管培养基 是否保持透明（阴性）、 或出现浑浊、絮状物 （阳性）。 对照菌液的生长（细菌在24小时内应有菌生长，真菌应在培养24～72小时有菌生长。） 培养及观察 培养 14天后，不能从外观上判断有无菌生长，可取该培养液适量转种至同种新鲜培养基中及营养琼脂斜面和改良马丁琼脂斜面培养基上，细菌培养 2天、真菌培养 3天，观察接种的同种新鲜培养基及营养琼脂和改良马丁琼脂斜面培养基上是否有菌生长；或取培养液（物）涂片，染色，镜检，判断是否有菌，必要时作菌种鉴定。 细菌转种的器具、分离 结果判定 当符合下列至少一个条件时方可判试验结果无效： ⑴ 无菌检查试验所用的设备及环境的微生物监控结果不符合无菌检查法的要求。 ⑵ 回顾无菌试验过程，发现有可能引起微生物污染的因素。 ⑶ 阴性对照管有菌生长。 (4) 供试品管中生长的微生物经鉴定后，确证是因无菌试验中所使用的物品和（或）无菌操作技术不当引起的。 试验若经确认无效，应重试。重试时，重新取同量供试品，依法检查，若无菌生长，判供试品符合规定；若有菌生长，判供试品不符合规定。 五、无菌检查操作流程 无菌操作流程 一盏酒精灯，以火焰为中心点可形成近10cm直径的“无菌区”。 六、其它说明 六、其它说明 检样过程中应在工作台上打开一块空白平板计数琼脂，其暴露时间应与检样时间相当，以了解检样在检验操作过程中有无受到来自空气的污染。 (要求：每平皿1CFU) 无菌检查的培养时间：7天？《药典》2000版 2005版药典是14天。 产品检测工作区与阳性对照菌接种区是否应分开？（2005版药典未明确？各检测中心是分设的） （2010版药典 ？ 2010.7.1生效）表1: 出厂制品不同规格及原液和半成品最少抽验数量 供试品 批产量(N)；装量（V） 最少抽验数量 注射剂 N≤100 5个 100＜N≤500 10个 N＞500 20个 冻干血液制品 V＞5ml 每柜冻干N≤200个 5个 每柜冻干N＞200个 10个 V≤5ml N≤100 5个 100＜N≤500 10个 N＞500 20个 原液或半成品 每个容器取样，取样量为每个容器制品总量的0.1%或不少于10ml。每开瓶一次，应如上法抽验。体外用诊断制品半成品每批抽验量应不少于3ml。 （2010版药典？）表2：上市制品监督抽验数量 品种及装量（V） 最少抽验数量 血液制品 V＜50ml 6个 V≥50ml 2个 其他生物制品 10个 （2010版 药典？）表3 :不同规格制品的最少接种量 规格 每支（瓶）供试品的最少接种量 液体制剂（ml） ≤1 全量 1＜V≤5 半量 5＜V＜20 2ml 20≤V＜50 10ml V≥50 半量 原液或半成品 半量 固体制剂 ＜50mg 全量 50mg≤M＜300mg 半量 300mg≤M＜ 150mg M≥ 半量 2010版药典的变化： 培养基的灭菌检查数量： =》不少于10支。 培养基的灭菌条件： 115℃灭菌30分钟=》验证合格的灭菌程序灭菌。 直接接种的数量：？未明确 七、审核提示 文件： 1）是否编制了作业文件和相适应的记录？有否包括检验