实验性单侧前牙反牙合修复体对大鼠髁突软骨中ihhpthrp信号轴表达的影响-effect of experimental unilateral anterior crossbite prosthesis on the expression of ihhpththrp signal axis in condylar cartilage of rats.docx

第四军医大 第四军医大学硕士学位论文 - - PAGE 1 - 缩略语表 缩略词 BMPs 英文全称 bone morphogenetic proteins 中文全称 骨形态发生蛋白 FGFs HA HE fibroblast growth factors hyaluronic acid hematoxylin-eosin 成纤维细胞生长因子 透明质酸 苏木精-伊红 HIF HMM IHC IHH IL IFN MMPs OA hypoxia-induced transcription factor humoral hypercalcemia malignancy immunohistochemistry Indian hedgehog interleukin interferon matrix metallo proteinases osteoarthritis 缺氧诱导因子 恶性体液性高钙血症 免疫组织化学 印第安刺猬蛋白 白细胞介素 干扰素 基质金属蛋白酶 骨关节病 PTH PTHrP PTH1R PCR TMJ TMD TGF parathyroid hormone parathyroid hormone related protein parathyroid hormone receptor-1 polymerase chain reaction temporomandibular joints temporomandibular disorders transforming growth factor 甲状旁腺激素 甲状旁腺激素相关蛋白 PTH/PTHrP 受体-1 多聚酶链式反应 颞下颌关节 颞下颌关节紊乱病 转化生长因子 实验性单侧前牙反牙合修复体对大鼠髁突 软骨中 Ihh /PTHrP 信号轴表达的影响 硕 士 研 究 生：郭 敏 导 师：王美青 教 授 辅 导 教 师：于世宾 副教授 第四军医大学口腔医学院解剖生理教研室，西安 710032 资助基金项目：国家自然科学基金 中文摘悹 关键词：颞下颌关节；咬合；髁突软骨；骨关节病；甲状旁腺激素相关蛋白； PTH/PTHrP 受体-1；印第安刺猬蛋白 骨骼的纵向生长依赖于生长板的软骨内成骨过程，此过程中软骨细胞依次经 历增殖、成熟、肥大化及最终凋亡等阶段。软骨内成骨受众多信号通路的共同调 节，以维持生长板的特有结构及细胞动力学特点。PTHrP 主要由关节周围软骨细 胞分泌，具有促进软骨细胞增殖、抑制其分化及凋亡的功能。Ihh 是脊椎动物 Hedgehog 蛋白家族中的一员，主要由前肥大软骨细胞分泌。Ihh 能够诱导关节周 围软骨膜中 PTHrP 生成增加，PTHrP 与软骨细胞表面其受体 PTH1R 结合，能够 抑制软骨细胞向前肥大、肥大软骨细胞分化，维持其增殖状态，导致 Ihh 的表达 下降，即形成 Ihh 与 PTHrP 之间的负反馈环调节。颞下颌关节骨关节病是一种常 见的口腔疾病，关节软骨渐进性退变及软骨下骨改建为其典型的病理改变。大量 关于 OA 病理机制的研究表明，Ihh/PTHrP 信号轴异常与该疾病的发生密切相关。 本研究首次建立单侧前牙反牙合的咬合紊乱大鼠模型，探究颞下颌关节髁突软骨在 此异常咬合力刺激下的组织学改变及髁突软骨中 Ihh/PTHrP 信号轴的表达变化。 - - PAGE 3 - 研究方法： 6 周龄雌性 SD 大鼠 60 只，体重 140-160g，随机、等量分为对照组和实验组。 实验组大鼠在麻醉、隔湿的条件下左侧上下前牙分别粘接统一规格的金属不良修 复体，造成左侧前牙反牙合的异常咬合接触。对照大鼠采用同样的操作，但不粘接 不良修复体，给予同样的饲养环境至实验结束。分别于实验开始的 2、4 及 8 周 末取材，使用苏木素-伊红染色探究大鼠颞下颌关节髁突软骨的组织形态学变化， 通过免疫组织化学染色、Real time-PCR 检测髁突软骨中 PTHrP、PTH1R、Ihh 及 Ptch 等的蛋白或 mRNA 水平表达。 结果： 1. HE 染色结果：对照组髁突软骨表面光滑而连续，细胞排列有序，由表及里 依次为纤维层、增殖层、肥大层和钙化软骨层。实验 2 周组的软骨退变多表现为 局部的细胞排列紊乱；4 周组可见小面积的无细胞区形成；8 周组出现明显骨关节 病样变，典型改变为：均质嗜酸性染色区形成、核固缩、纤维降解、细胞增殖成 簇及软骨陷窝空虚。实验 2 周组软骨细胞数目较对照组明显增加（P0.01），4、8 周组软骨细胞数目显著减少（P0.01、P0.01）。 2. 免疫组化结果：PTHrP 阳性细胞主要分布于髁突软骨肥大浅层，实验 8 周 组阳性细胞率显著增加（P0.01）；PTH1R 阳性