2013生物选修3（配北师大）ppt课件第4章第2节.pptVIP

第2节　基因工程的操作程序;;1.简述基因工程的操作程序 2．说明目的基因的获得方法 3．理解基因表达载体的构建过程 4．掌握将目的基因导入受体细胞的方法 5．说明目的基因检测与鉴定的方法?;【重点】　基因工程的操作程序 【难点】　理解基因表达载体的构建是基因工程的核心 ;情景导引 基因工程技术已广泛应 用于工业、农业、医药 和治疗等方面。1990年, 美国科学家布莱泽尔对一个患腺苷酸氨酶(ADA)缺乏症的4岁女孩进行人类历史上首次基因治疗，获得成功,标志;着基因治疗真正在临床上实施。目前基因治疗已从单基因遗传病扩展到多个病种范围，临床试验已达600多个，基因治疗已取得初步成效。那么基因工程是如何进行的呢？让我们一起来学习基因工程的操作程序。;课前预习学案;化学反应;鸟枪法;思考感悟 1.利用PCR仪扩增DNA的过程是怎样的？ 提示：目的基因受热解旋形成单链DNA，与引物结合，在DNA聚合酶的作用下延伸形成DNA。;二、基因表达载体的构建 1．大肠杆菌质粒DNA提取实验 (1)原理： ①方法：__________。;(2)实验步骤 ①取1 mL含质粒的大肠杆菌菌液接种到100 mL ___________中，37℃摇床振荡培养8～10 h。 ②取1.4 mL菌液于1.5 mLEP管中，离心弃上清液。 ③加预冷的________，充分混合。;④加溶液Ⅱ，轻轻翻转混匀。 ⑤加预冷溶液Ⅲ