腺病毒介导ctla-4ig基因局部转染抑制大鼠异体复合组织移植急性排斥反应的研究-adenovirus-mediated local transfection of ctla - 4ig gene inhibits acute rejection of allogenic composite tissue transplantation in rats.docxVIP

第四军医大 第四军医大学硕士学位论文 - - 缩略语表 缩略词 英文全称 中文全称 Ad APC adenovirus antigen presenting cell 腺病毒 抗原提呈细胞 BN Brown Norway Brown Norway 近交系大鼠 CTA composite tissue allotransplatation 同种异体复合组织移植 CTLA-4 cytotoxic-T-lymphocyte-associated antigen-4 细胞毒性 T 淋巴细胞相 关抗原－4 EGFP enhanced green fluorescence protein 增强型绿色荧光蛋白 IL-2 interleukin-2 白细胞介素-2 MHC major histocompatibility complex 主要组织相容性复合物 PBS phosphate buffered saline 磷酸缓冲盐溶液 PFU plaque forming unit 空斑形成单位 SPF specific pathogen free animal 无特殊病原体动物 TCR T cell receptor T 细胞受体 腺病毒介导 CTLA-4Ig 基因局部转染抑制大鼠异体 复合组织移植急性排斥反应的研究 硕士研究 生：赵克锋 导 师：郭树忠 教授 第四军医大学西京医院全军整形外科研究所，西安 710032 中文摘要 目的 ： 观察腺病毒介导 融合基 因细胞 毒性 T 淋巴 细胞相 关抗原 -4 （AdCTLA-4Ig）局部转染大鼠同种异体复合组织对急性排斥反应的抑制作 用。 方法：以近交系 Brown Norway 大鼠为供体，Lewis 大鼠为受体，采用 下腹部游离皮瓣作为异体复合组织移植（composite tissue allotransplantation, CTA）模型。将受者分为 3 组，A 组（空白对照组）：异体皮瓣离体保存期 间不感染腺病毒，只灌注 PBS 溶液；B 组（阴性对照组）：异体皮瓣离体保 存期间灌注携带增强型绿色荧光蛋白的重组腺病毒（Ad-EGFP）；C 组（基 因治疗组）：皮瓣离体保存期间灌注 AdCTLA-4Ig。术后观察各组移植皮瓣的 排斥情况及存活天数，进行组织病理学检查，并观察 CTLA-4Ig 在移植组织 中的表达情况及对急性排斥反应的抑制作用。 结果：（1）A 组、B 组皮瓣移植物平均生存时间分别为（7.8±1.5）天和 （7.1±1.6）天，C 组移植皮瓣平均存活时间为（10.4±2.3）天，C 组存活期 长于 A 组和 B 组，差异有统计学意义（P0.01）。（2）移植皮瓣病理学检查： 术后第 7 天，A 组与 B 组移植皮瓣均发生严重急性排斥反应，而 C 组排斥反 应较 A 组和 B 组轻微，但 C 组术后第 11 天也表现出严重急性排斥反应。（3） 移植前后血清白细胞介素 2（interleukin-2, IL-2）水平：各组移植术后早期发 生急性排斥反应时，IL-2 均有明显升高，但实验组血清 IL-2 水平在第 3 天、 第 7 天时均明显低于两对照组（P0.01）。（4）免疫组化：术后第 5 天时 C 组移植皮瓣局部可见 CTLA-4Ig 阳性表达，而 A、B 两组表达均阴性。 结论：建立了一种新的异体复合组织移植局部基因转染模型，皮瓣灌 注 AdCTLA-4Ig 能获得融合基因在移植复合组织中的表达，移植物局部产生 的 CTLA-4Ig 能抑制皮瓣移植物急性排斥反应的发生，延长移植物存活时间。 关键词：同种异体复合组织移植；CTLA-4Ig；基因治疗；急性排斥反应； 腺病毒载体 Adenovirus mediates CTLA-4Ig gene local transfer to inhibit the acute rejection of composite tissue allograft in rats Candidate for master: Zhao Kefeng Supervisor: Guo Shuzhong Institute of Plastic Surgery of People’s Liberation Army, Xijing Hospital, Fourth Military Medical University, Xi’an 710032, China Abstract Objective: To observe the effect of CTLA-4Ig gene transfer delivered by adenovirus to inhibit the acute rejection of composite tissue