大专生物化学.酶.ppt

* * 酶活力：是指酶催化一定化学反应的能力。酶活力的大小可用在一定条件下，酶催化某一化学反应的速度来表示，酶催化反应速度愈大，酶活力愈高，反之活力愈低。测定酶活力实际就是测定酶促反应的速度。酶促反应速度可用单位时间内、单位体积中底物的减少量或产物的增加量来表示。 * ATP三磷酸核苷酸与能量转换有关 * 辅酶：与酶蛋白结合比较松，用透析法可以除去的小分子有机物；辅基相反。 * NAD（烟酰胺腺嘌呤二核苷酸）是脱氢酶的辅酶 ，是氧化作用中的电子载体 * * 酶活力：酶催化一定化学反应的能力，用在一定条件下，酶所催化某一反应的速率表示。 * 限速酶：它是指整条代谢通路中催化反应速度最慢的酶,它不但可以影响整条代谢途径的总速度,还可以改变代谢方向. 　　在代谢过程中的一系列反应中，如果其中一个反应进行的很慢，便成为整个过程的限速步骤，催化此限速步骤的酶称为限速酶或者标兵酶。标兵酶是一种调节酶，它们常常也是别构酶。 * * * 蛋白激酶A的变构调节 * 变构调节 * 变构激活 变构抑制 变构酶的S形曲线 [S] V 无变构效应剂 变构酶常为多个亚基构成的寡聚体，具有协同效应。 * 协同效应： 蛋白质分子（酶）中的1个亚基与其配体结合能影响其它亚基与配体（底物）结合能力的现象。 包括：正协同效应和负协同效应 * （二） 酶的共价修饰调节 共价修饰(covalent modification) 在其他酶的催化下，酶蛋白肽链上的一些基团可与某种化学基团发生可逆的共价结合，从而改变酶的活性，此过程称为共价修饰。 常见类型 磷酸化与脱磷酸化（最常见） 乙酰化和脱乙酰化 甲基化和脱甲基化 腺苷化和脱腺苷化 －SH与－S－S互变 * 　 * 共价修饰调节的特点 ①受共价修饰的酶存在有（高）活性和无（低）活性两种形式； ②催化正、逆转化所需的其他酶往往不同 ③是体内经济、有效的快速调节方式。 同一个酶可以同时受变构调节和共价修饰调节。 * 瀑布效应（级联放大效应） * （三）酶原与酶原的激活 酶原 (zymogen) 有些酶在细胞内合成或初分泌时只是酶的无活性前体，此前体物质称为酶原。 酶原的激活 在一定条件下，酶原向有活性酶转化的过程。 * 酶原激活的机理 酶 原 分子构象发生改变 形成或暴露出酶的活性中心 一个或几个特定的肽键断裂，水解掉一个或几个短肽 在特定条件下 * 胰蛋白酶原的激活过程 胃蛋白酶原的激活过程 胃蛋白酶原的激活过程 * 酶原激活的生理意义 1. 避免细胞产生的酶对细胞进行自身消化 2. 并使酶在特定的部位和环境中发挥作用，保证体内代谢正常进行。 3. 酶原可以视为酶的储存形式。 * 二、 酶含量的调节 （一）酶蛋白合成的诱导和阻遏 诱导作用(induction) 阻遏作用(repression) （二）酶降解的调控 3. 同工酶(isoenzyme) ——能催化相同的化学反应，但在蛋白质分子的结构、理化性质和免疫性能等方面都存在明显差异的一组酶。 乳酸脱氢酶 （LDH） M H M M M M M4 H M M M M3H M M H H M2H2 M H H H MH3 H H H H H4 *生理及临床意义 在代谢调节上起着重要的作用； 用于解释发育过程中阶段特有的代谢特征； 同工酶谱的改变有助于对疾病的诊断； 同工酶可以作为遗传标志，用于遗传分析研究。 心肌梗死和肝病病人血清LDH同工酶谱的变化 1 酶活性 心肌梗死酶谱 正常酶谱 肝病酶谱 2 3 4 5 一、材料预处理及破碎细胞 1、物理粉碎法 2、化学法 2.5.3 酶的分离、提纯及保存 1、物理粉碎法 （1）研磨 （2）机械捣碎 （3）高压法 （4）爆破性减压法 （5）快速冰冻融化法 2、化学法 （1）渗透作用 （2）干燥处理 （3）自溶 （4）溶菌酶处理 （5）酶处理 （6）表面活性剂处理 （7）其他 二、抽提 1、PH 2、盐 3、温度 4、抽提液用量 5、其他 三、酶溶液的净化与脱色 1、使用絮凝剂 2、脱色 四、浓缩 1、冷冻干燥法 2、蒸发法 3、超过滤 五、酶分离纯化的基本过程 1、酶分离纯化方法的选择 2、酶分离纯化过程中的一些数据 3、结晶 六、酶的制剂与保存 1、酶制剂 2、酶的保存 （1）冰箱保存；（2）加保护剂； （3）制成干粉：冷冻干燥法 2.5.4 酶的应用 一、酶在食品工业上的应用 1、淀粉加工 2、乳品工业 3、果蔬加工 4、酿酒工业 5、制糖工业 6、肉类及鱼类加工 7、面包烤焙食品制造 二、在