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API3200 操作手册
关于仪器
在本节中,介绍了关于API 3200? LC/MS/MS系统的应用信息和特性信息。本系统包括一台三重四极杆、Turbo V?源、一台计算机、以及Analyst?软件。
警告!如果需要移动系统,请联系客户服务代表,寻求帮助。存在人身伤害或仪器损坏的风险。
前视图线路调节变压器低真空泵平台离子源质谱仪低真空泵
前视图
线路调节变压器
低真空泵
平台
离子源
质谱仪
低真空泵
API 3200仪器和平台
系统的原理
在本节中,介绍了API 3200 LC/MS/MS系统的特性和应用。
系统的应用
API 3200系统用于小分子的定量分析。
该应用涉及特定分子量化合物的测量,通常是药物或液态样品中的代谢产物,它们产生的碎片离子可用于确定化合物在感兴趣样品中的准确含量。对于各种已知浓度的化合物,采用相应的质谱仪信号强度标准曲线,进行定量分析。随后,将测试样品中的信号与标准曲线进行比对,从而确定浓度。
该应用使用的典型扫描类型为MRM(多重反应监测)。
仪器特性
API 3200系统是一种平台式三重四极杆,可对多种生物基体中的生物分子进行灵敏的定量分析。它具有以下特性:
标准Turbo V源提供了即插即用型TurboIonSpray?和APCI喷针,耐用的陶瓷接口,可满足高流速的要求。
Linac?碰撞室消除了“交叉污染”,允许在一个LC运行过程中进行多组份分析。
耐震幕帘Gas?接口技术与改进的气体动力学,降低了维护,并增加了正常运行时间。
在m/z 5–1800的质量范围内进行扫描。
一体式切换阀和一体式注射泵,提供了便利的样品导入灵活性。
选配的相容源,包括DuoSpray?源、PhotoSpray?源、以及NanoSpray? II源结构,进一步提升了灵活性。
IDA(信息相关采集),使LC扫描所能采集的信息量最大化。
与选配的软件包兼容,如代谢物ID,Automaton,BioAnalyst?等等。
仪器是如何工作的
API 3200质谱仪具有多重四极杆过滤器,可根据它们的m/z(质量/电荷比)传输离子。对于进入离子通道的离子,在通往Q1之前,首先由Q0聚焦。
Q1是一种过滤四极杆,它负责在离子进入Q2之前对其进行分类,在Linac碰撞室中,通过与气体分子的碰撞,离子破碎为碎片。采用该技术,通过设计试验,可测量离子产物的m/z,从而确定母离子的组份。通过Q2后,离子进入Q3,进一步对其进行过滤,然后进入检测器。在检测器中,离子将产生电流,将其转换为电压脉冲。离开检测器的电压脉冲与进入检测器的离子量呈正比。仪器能够监测这些电压脉冲,并将检测到的信息转换为信号。该信号代表了特定m/z的离子强度,仪器能够将这类信息以质谱形式显示出来。关于更多信息,请参见下图“离子光学路径”。
Linac碰撞室CUR气帘气体检测器DF(
Linac
碰撞室
CUR气帘气体
检测器
DF(偏转板)
聚焦器
气帘板
DP(锥孔)
离子光学路径
API 3200系统采用了Turbo V源,以便从液态样品产生离子。Turbo V源可使用TurboIonSpray喷针或APCI(大气压力化学离子源)喷针。仪器采用相应配置,可执行复杂的MS/MS分析,但对于不太严格的分析要求,可执行单一的MS扫描。
可用扫描类型
API 3200系统采用了相应配置,可执行四极杆模式扫描,在分析样品时,或单独进行,或以组合方式进行。
扫描技术
API 3200系统可采用以下扫描技术:
MS:在MS扫描中(也称为单MS扫描),离子根据其质量/电荷比加以分离。单MS扫描可用于确定或确认化合物的分子量。单MS扫描也称为测量扫描。除了质量外,MS扫描不提供关于离子化学组成的任何信息。要想获得关于离子的更多信息,需执行MS/MS扫描。
MS/MS:MS/MS扫描用于识别分子类型。使用单MS扫描,可确定化合物的分子量,但无法确定其成分。在三重四极杆模式下,MS/MS可通过CAD(碰撞引发分裂)产生分子离子的碎片。分子离子(或前体离子)在碰撞室中加速,与中性气体发生碰撞。如果前体离子具有足够的能量,将会产生分裂,生成与指纹类似的特征离子碎片。通过MS/MS谱,可确定分子离子的成分。例如,在药物新陈代谢中,执行MS/MS扫描,可确定代谢物ID。对于更具选择性的MS/MS扫描(MRM),在定量应用中得以应用。MRM扫描可用于确定化合物在样品中的含量。在下面的章节中,给出了关于MRM扫描类型的完整介绍。
四极杆模式扫描
三重四极杆仪器具有高灵敏的MRM功能,这是定量实验所需的。此外,它们还具有专门程度很高的扫描类型,如前体离子和中性损失扫描,使用它们,能够对样品化合物执行更先进的搜索。API 3200系统具有
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