CAR―T细胞在肿瘤治疗中研究进展.doc

CAR―T细胞在肿瘤治疗中研究进展 　　【摘 要】以嵌合型抗原受体（chimericantigenreceptor，CAR）为基础的细胞免疫治疗是一种新的治疗恶性肿瘤的模式，是近年来发展非常迅速的一种过继性免疫治疗技术，其为部分晚期实体瘤患者带来治愈的希望。但该技术同时也存在脱靶效应和细胞因子释放综合征等临床应用风险。本文就CAR-T细胞免疫疗法的原理和在肿瘤的临床治疗领域的研究进展作综述性的阐述。 　　【关键词】嵌合型抗原受体；免疫治疗；肿瘤 　　嵌合型抗原受体（chimericantigenreceptor，CAR）由胞外抗原结合域scFv、跨膜结构域和胞内信号传导结构域组成。其通过基因修改技术，将能识别肿瘤相关抗原的抗体融合表达于自体T细胞的表面，被修改过的T细胞因此具有对肿瘤细胞的靶向杀伤力。尽管在B细胞源性肿瘤中CAR-T细胞治疗取得了较好的疗效，但在实体瘤中CAR-T细胞还面临挑战。为获得较好临床疗效CAR-T细胞必须具有以下功能：首先必须对明确区分肿瘤与正常组织的抗原具有特异性；其次必须归巢并且渗透至围绕肿瘤的促结缔组织形成基质；当到达肿瘤内后，必须能够扩增、持续存在并且在主要由免疫抑制介质组成的微环境中发挥细胞毒作用。这些可通过内在和/或外在对CAR-T细胞进行修饰来实现。 　　一、CAR-T细胞抗肿瘤的机制 　　CTL是经抗原递呈细胞激活的CD8+T淋巴细胞。T细胞的活化需要双信号途径，第一信号途径为抗原递呈细胞上的MHC分子-抗原肽复合体与T细胞上的TCR结合，第二信号为抗原递呈细胞上的共刺激分子B7与T细胞上的CD28分子结合，在这两种信号的共同作用下，T细胞会活化增殖为CTL细胞。当CTL细胞再次遇到携带有相同MHC分子-抗原肽复合体的肿瘤细胞时，就会通过同样的机制与之结合，并分泌穿孔蛋白、粒酶及细胞因子协同作用杀死肿瘤细胞。在T细胞活化的第一信号途径中，接受肿瘤抗原信息的TCR分子本身并不能直接传递信号，CD3分子负责向T细胞传递信号。CD3由3对复合物构成，分别为εδ、εγ及ζζ分子。εδ及εγ分子各含有一对ITAM，而ζζ分子含有3对IATM，这样一共合起来有5对ITAM能够对下游蛋白激酶产生磷酸化。当TCR与MHC-抗原肽复合体结合后，TCR又与CD3结合形成复合体后，引起ITAM磷酸化激活下游蛋白使T细胞活化增殖。因此，ITAM的作用就像一个信号放大器，这样的复合分子能够很敏感地感知TCR受体的情况并及时地激活T细胞，使T细胞增生活化转变为CTL细胞，CTL细胞反过来对含有肿瘤抗原的肿瘤细胞进行免疫攻击。 　　二、CAR-T细胞疗法的临床效果 　　（一）CAR-T细胞治疗血液系统肿瘤 　　针对CD19的CAR有多种构建形式，临床试验涉及急性淋巴细胞白血病（acute lymphoblastic leukemia，ALL）、慢性淋巴细胞白血病（chronic lymphocyticleukemia，CLL）、非霍奇金淋巴瘤（non-Hodgkin’slymphoma，HL）和小淋巴细胞淋巴瘤（small lymphocyticlymphoma，SLL）等多种血液肿瘤。目前针对CD19的CAR-T临床治疗结果令人振奋，即使针对难治、复发的患者也能取得较高的缓解率。在针对CD19这个成功的靶点开展相关工作的同时，研究人员也在积极寻找更多其他可用于血液肿瘤治疗的分子。选择CD33作为靶点构建的第二代CAR-T细胞―CART-33（CAR.33-4-1BBζ-GFP），已用于1例复发的急性髓系白血病病例的治疗。患者在回输了总量为1.12×109个经改造的自体T细胞之后，相继出现了发热、细胞因子释放综合征、全血细胞减少症和高胆红素血症等症状，而原始血细胞（Blast cells）的比例在治疗初期由大于50%降低至6%，但后续病情却持续发展，至第9周时原始血细胞回升至70%。研究者进行了针对CD20的临床Ⅰ期试验，应用第三代CAR-T细胞治疗了3例患者其中2例患者的病程在12～24个月内未继续发展；另1例患者则表现为部分缓解（partial remission，PR），12个月后复发。上述结果均不如针对CD19为靶点的试验结果理想。另外，还有针对CD22、CD138、CD30和LewisY等靶点的多项CAR-T细胞的免疫疗法也正在招募患者进行Ⅰ期临床试验。 　　（二）CAR-T细胞治疗实体肿瘤 　　CAR-T细胞免疫疗法在实体瘤临床试验中的表现有些不尽人意。由于实体肿瘤一般具有包膜，不利于CAR-T细胞的浸润，且其肿瘤细胞的多样性也要高于血液肿瘤，以及肿瘤附近还存在免疫抑制微环境，上述原因均可能导致CAR-T细胞免疫疗法对实体瘤的治疗效果不理想。目前，实体瘤的CAR-T临床试验相对较少