植物组织机构培养基本技术.pdfVIP

3 1 培养基及其配制 第 章 植物组织培养基本技术 本章学习目标 1 掌握植物组织培养技术中的培养基配制方法。 2 掌握外植体的选择、灭菌、接种和培养的原理和方法。 3 掌握器官、组织培养及组培苗的驯化移栽方法。 植物组织培养是一项技术性较强的工作。为了确保组织培养工作顺利进行,除了具备基本 的实验设备条件,还要求熟练掌握植物离体培养的基本技术,包括培养基的配制、外植体的选 择与处理、无菌操作技术以及环境条件控制等。 3 1 培养基及其配制 培养基是离体植物 (外植体)赖以生长、分化的基础,是根据植物的需求,人工配制的含 有各种营养成分的营养液。植物组织培养的成功与否,除了培养材料本身的因素外,很大程度 上取决于对培养基的选择。 一、培养基的成分 培养基的种类、成分等直接影响培养材料的生长发育,应根据培养材料的种类和培养部位 选取适宜的培养基。 培养基的成分主要包括5 大类:无机养分、有机养分、植物生长调节物质、糖 (碳源) 以 及介质或载体 (纸桥、琼脂等),此外还含有大量的水分,可提供植物所需的碳、氢、氧,配 制培养基时一般用离子交换水、蒸馏水或重蒸馏水。 (一)无机养分 无机养分是指植物在生长发育时所必需的各种化学元素。主要是各种矿质元素、无机盐 等。根据植物对无机营养的吸收量,可以将它们分为大量元素和微量元素。植物所需浓度大于 0 5 mmol/ L 的元素称为大量元素,而所需浓度小于0 5 mmol/ L 的称为微量元素。 大量元素主要有氮、磷、钾、钙、镁、硫、碳及来源于水中的氢、氧,微量元素主要有 铁、锰、锌、铜、硼、碘、钼和钴等。各种元素的作用和缺乏时的表现如下: (1)氮 枝叶生长需要大量氮元素,它主要参与营养器官生长和发育,可以硝态氮或铵态 28 第3 章 植物组织培养基本技术 氮的形式供给。缺氮时,老叶先发黄;氮过量,枝叶会过度茂盛,加之磷肥不足时,则不开花 或花期延迟。 (2)磷 磷对植物的生长和生理活动起重要作用。缺磷时,植株生长缓慢,老叶暗紫色。 (3)钾 钾促进花卉生长健壮,增强抗性,茎秆挺拔。缺钾时,叶尖、叶缘枯焦,叶片呈 皱曲状,老叶发黄或火烧状。 (4)钙 钙促进幼根生长。缺钙时嫩叶失绿,叶缘向上卷曲, 出现白色条纹。 (5)镁 镁影响酶的活性,并决定新陈代谢的过程。缺镁时,叶片边缘及中央部分失绿而 变白。 (6)硫 硫影响蛋白质的合成。缺硫时,叶色变为淡绿,进而变白。 (7)铁 铁是用量较多的一种微量元素,铁对叶绿素的合成和延长生长起重要作用。它不 容易被植物直接吸收,在培养基中螯合成 Fe - EDTA 才能被植物利用。缺铁时,绿叶变黄, 进而变白。 (8)锰 锰参与植物的光合、呼吸代谢过程,影响根系生长。缺锰时,叶片上出现缺绿斑 点或条纹。 (9)锌 锌是各种酶的构成要素,能增强光合作用效率,参与生长素的代谢,促进生殖器 官发育和提高抗逆性。缺锌时,叶子变黄,或出现白斑,叶子小。 (10)铜 铜有促进离体根生长的作用。 (11)硼 硼能促进生殖器官的正常发育,参与蛋白质合成或糖类运输。缺硼时,叶失绿, 叶缘向上卷曲黄化,变厚变脆;顶芽死亡。 (12)钼 钼是氮素代谢的重要元素,参与繁殖器官的建成。 (13)钴 缺钴时,叶片失绿而卷曲,整个叶片向上弯曲凋枯。 (二)有机养分 植物生长不仅需要无机养分,还要加入一定量的有机养分以利于快速生长。有机养分是指 植物生长发育时所必需的有机碳、氢、氮等物质,主要有各种维生素、肌醇和氨基酸等。 (1) 维生素 维生素在植物组织中起着十分重要的作用,它们能够以辅酶的形式参与多种 酶系的反应,直接影响到蛋白质、糖、脂肪等物质的代谢活动,对生长、分化等有很好的促进 作用。常用的维生