不同浓度Cd2对草鱼组织器官及抗氧化酶SOD活性影响.docVIP

不同浓度Cd2+对草鱼组织器官及抗氧化酶SOD活性的影响 　　摘要：以草鱼为试验对象，采用静水测试法，研究养殖水体中不同浓度Cd2+对草鱼组织器官及肝脏中超氧化物歧化酶（SOD）活性的影响，试图探讨重金属的毒性积累和毒性机制。采用不同浓度（1.98、2.96、4.44、6.67、10.00 mg/L）的Cd2+溶液浸浴法处理草鱼鱼种，检测组织抗氧化酶SOD的活性变化及对组织器官的影响。结果表明，镉对草鱼种24、48、96 h的半致死浓度分别为1.959、1.830、1.245、1.011 mg/L；安全浓度为0.479 0、0.101 1 mg/L。Cd2+对草鱼的毒性效应随着时间的延长而增强。Cd2+对草鱼鱼种肝脏的SOD活性有明显的影响（P0.5）。与对照组相比，经高浓度和低浓度处理后24、96 h显著下降（P0.5）；每组24、96 h的SOD活性无显著差异。得出结论，Cd2+对草鱼SOD活性的影响随时间延长而呈下降的趋势。抗氧化酶SOD、组织器官的变化这2项指标都能够敏感地指示Cd2+的毒性水平，是较理想的生态毒理学指标。 　　关键词：草鱼；Cd2+；半致死浓度；安全浓度；组织器官；抗氧化物歧化酶（SOD） 　　中图分类号： S943.112.91 文献标志码： A 　　文章编号：1002-1302（2016）11-0261-03 　　镉是一种灰色而有光泽的重金属，微量且广泛地存在于环境中[1]。金属镉毒性很低，但其化合物毒性很大。镉在体内积蓄，潜伏期可达10～30年之久，为已知最易在体内积聚的毒物之一[2]。随着工业生产业的发展、海上石油和运输业的发展以及废水的排出，镉污染在水中的污染越来越严重，已转变为潜在性的社会危害。由于现代工农业的发展，大量的重金属污染物通过多种途径释放并进入水体，水质污染日益严重。一些重金属离子浓度超标对鱼类有毒害作用，常常会扰乱鱼类的生命活动，引起鱼类的中毒和死亡，且已证实水中的重金属污染物可通过食物链传递进入人体并对人体造成严重的危害。 　　国内外水产科研者对重金属镉对鱼类的研究取得了一些成果。然而，由于重金属在水生生态系统中呈现较为复杂的形态、相对较高的活性、对鱼类较强的毒性和鱼类承受重金属毒害的机理复杂性，并且有关重金属在水生生态系统中的形态、分布、?D化和对鱼类的毒害机理尚未弄清楚，因此为进一步推动重金属污染对鱼类毒性的研究与防治，有必要对其进行进一步的研究。 　　本研究通过养殖水体中不同浓度Cd2+对草鱼脑和肝脏组织及抗氧化酶超氧化物歧化酶（SOD）活性的影响试验，为重金属的毒性积累和毒性机制提供参考依据。 　　1 材料与方法 　　1.1 试验动物 　　采用草鱼鱼种为试验对象，采自河南省洛阳市郊鱼苗场。试验鱼健壮，体长范围为（10.0±2.0） cm，体质量范围为（10.0±3.0） g。鱼种自养殖场运回来后驯养1周后再进行试验。 　　1.2 试验设计与方法 　　试验用水为自来水，水温17～18 ℃，pH值为7.9，溶解空气13.6272 cm3/L，溶解氧4.6089 cm3/L，水硬度33.14。试验在40 cm×25 cm×25 cm水族箱中进行。水族箱中加入15 L/箱毒液，将配制好的毒液于空气中暴露48 h，后放入受试鱼10尾。 　　1.2.1 急性毒性试验 采用静水法生物测试[3]。试验周期为96 h，为防止粪便对水质造成污染，试验期间不进行喂食。每天24 h连续充气。每组10尾鱼，共6组；按等比级数设5个浓度梯度，并设1个对照组，同时设有3个重复组，共160尾鱼。用尼龙小孔抄网从预先筛选出来的试验对象中随机选取10尾鱼放入每个试验容器中，所有鱼在20 min内转移完毕。观察记录，随时捞出死亡个体，并记录各组鱼苗的24、48、72、96 h的死亡数。死亡的标准是鱼腹部向上，鳃盖停止运动。采用直线内插法，以浓度的常用对数为横坐标，死亡率的概率单位为纵坐标，求出各自的半数致死浓度（LC50），并根据公式SCⅠ=（48h LC50×0.3）/（24 h LC50/48 h LC50）2和SCⅡ=96 h LC50×0.1求安全浓度（SC）。 　　1.2.2 样品采集 及时捞出各浓度下死亡的草鱼以及对照组的草鱼，取出肝脏和脑组织，将一部分组织放入10%甲醛溶液中固定，用来制作组织切片；另一部分肝脏装入1.5 mL EP管中并做好标记，置于-20 ℃冰箱中保存，最后采用试剂盒（南京建成生物工程研究所生产）的方法测定肝脏组织中超氧化物歧化酶（SOD）的活性。 　　1.3 数据处理 　　试验测得的所有数据采用Excel进行整理；运用SPSS软件中的one-way ANOVA检验进行统计分析。 　　2 结果与分析 　　2.1 Cd2+对草鱼的急性