乳腺癌组织中沉默信息调节因子和富含半胱氨酸酸性分泌蛋白表达及临床意义.docVIP

乳腺癌组织中沉默信息调节因子和富含半胱氨酸的酸性分泌蛋白的表达及临床意义 　　[摘要] 目的 探讨沉默信息调节因子（SIRT1）和富含半胱氨酸的酸性分泌蛋白（SPARC）在乳腺癌组织中的表达及其与临床病理指标之间的关系。 方法 收集潍坊市人民医院2014年1～6月经病理明确诊断的乳腺浸润性导管癌石蜡标本60例和乳腺纤维瘤标本15例，应用免疫组化法检测乳腺癌组织和乳腺纤维腺瘤组织中SIRT1和SPARC的表达情况。 结果 SIRT1在乳腺癌组织中的阳性表达率（61.7%，37/60）明显高于乳腺纤维腺瘤组织（33.3%，5/15），差异有统计学意义（P 0.05）；有乳腺癌淋巴结转移的SIRT1高表达率（72.0%，18/25）高于无淋巴结转移（25.7%，9/35），TNM分期为Ⅲ期的乳腺癌中SIRT1高表达率（77.3%，17/22）高于Ⅰ、Ⅱ期（26.3%，10/38），差异均有高度统计学意义（P 0.01）。SPARC在乳腺癌间质细胞的高表达率（73.3%，44/60）明显高于肿瘤细胞（10.0%，6/60）和乳腺纤维腺瘤间质细胞（40.0%，6/15），差异均有统计学意义（P 0.05）；SPARC在乳腺癌有淋巴结转移的高表达率（96.0%，24/25）高于无淋巴结转移的（74.3%，26/35），差异有统计学意义（P 0.05）。 结论 乳腺癌中SIRT1、SPARC的高表达与乳腺癌的发生、发展、侵袭和转移有关。 　　[关键词] 乳腺癌；乳腺肿瘤；SIRT1；SPARC 　　[中图分类号] R737.9 [文献标识码] A [文章编号] 1673-7210（2015）01（c）-0015-04 　　据世界卫生组织（WHO）统计资料显示，2000年全球新发女性乳腺癌病例超过100万，标化发病率为35.66/10万，标化病死率为12.5/10万，乳腺癌已成为全球妇女首发恶性肿瘤。在乳腺癌的病理类型中，浸润性导管癌恶性程度较高，预后较差。沉默信息调节因子（SIRT1）基因位于10q22.1，长约33 kb，蛋白分子量约为60 kU，具有烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（NAD）依赖的脱乙酰基酶活性，其广泛存在于人体各个细胞内。富含半胱氨酸的酸性分泌蛋白（SPARC），是一种非胶原糖蛋白，它在肿瘤中的作用是促进肿瘤细胞黏附，诱导肿瘤细胞迁移，并改变肿瘤细胞基质成分。两者均与乳腺癌的发生、发展、浸润和转移有关。本研究采用免疫组化检测SIRT1和SPARC在乳腺癌组织中的表达情况，并进一步分析SIRT1、SPARC与临床病理因素之间的关系。 　　1 材料与方法 　　1.1 实验材料 　　标本均为来源于潍坊市人民医院2014年1～6月经病理明确诊断的乳腺浸润性导管癌石蜡60例和乳腺纤维瘤15例，均为女性，年龄≥18岁，中位年龄43岁。所有乳腺癌患者均接受乳腺癌改良根治术或保乳术，术前均未行任何放疗及化疗治疗，无严重、未控制的内科疾病及感染，无病生存时间≥6个月。本研究已经医院伦理委员会研究通过，本研究均在患者及家属知情同意并签署知情同意书的条件下进行。依据TNM分期标准，Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ期患者分别为22、16、22例，且伴有淋巴结转移者25例，无淋巴结转移者35例，每例标本均有免疫组化法检测的雌激素受体（estrogen receptor，ER）和孕激素受体（progesterone receptor，PR）表达情况。 　　1.2 实验方法 　　SIRT1鼠抗人单克隆抗体（一抗，工作浓度1∶400）及SPARC兔抗人单克隆抗体（一抗，工作浓度1∶200）均购自北京博奥森生物技术有限公司，免疫组化试剂盒、抗体稀释液、PBS冲洗液均购自北京中杉金桥生物技术有限公司。免疫组化采用Envision法，组织标本依次经过常规切片，脱蜡入水，高压修复，严格按照试剂盒说明书进行。以已知阳性切片作为阳性对照，用磷酸盐缓冲液代替一抗作为阴性对照。 　　1.3 结果判定 　　经两位有经验的病理科专家对结果进行判定，SIRT1在细胞中阳性表达为黄色或棕黄色，SPARC在细胞中阳性表达为棕黄色[1]。根据染色程度及阳性细胞表达数进行评分：不着色记为0分，着色淡者记为1分，着色中等记为2分，着色深者记为3分，阳性细胞表达数：≤5%记为0分，5%～25%记为1分，25%～50%记为2分，50%记为3分；两者得分乘积为最后得分。0～1分记为阴性（-），2～3分记为弱阳性（+），4～6分记为阳性（++），6分记为强阳性（+++）。在统计分析中将表达（-）～（+）划分为低表达，（++）～（+++）划分为高表达。 　　1.4 统计学方法 　　采用 SPSS 21.0 软件进行统计学分析，SIRT1和SPARC的表达及其与临床病理因素的分析采用χ2检验