神经系统安全性评价3 - 副本培训课件.pptx

药物的神经系统安全性评价 药物的神经系统不良反应包括：1.药物致脑炎样反应：人用狂犬病疫苗、麻疹毒活疫苗、咪唑类驱虫药等。2.药物致脑血管损害：三环类抗抑郁药、肾上腺皮质激素、雄激素等，均可致血压升高，造成脑出血。3.药物致颅内压增高：皮质激素类、氨节西林、氟喹诺酮类等。4.药物致中毒性脑病：头孢菌素类、抗结核药、苯妥英钠、丙戊酸钠、卡马西平等。5.药物致锥体外系反应：吩噻嗪类三氟拉嗪、三氟丙嗪、甲哌氯丙嗪、氟奋乃静和奋乃静、氯丙嗪；某些钙离子拮抗剂:盐酸氟桂嗪以及甲氧氯普胺等。6.药物致周围神经损害：抗结核药物、氨基糖苷类、利尿剂等。7.药物致神经—肌肉阻滞型病变：肾上腺皮质激素类、氨基糖苷类抗生素、氯喹、苯妥英钠等。8.药物致中枢神经系统的其它不良反应：甲硝唑、万古霉素、洋地黄、喹诺酮类抗生素等。神经系统安全性在体研究1.运动/感觉反射：采用热刺激大鼠尾部的方法，测定甩尾潜伏期(TFL)作为痛阈，以痛阈提高的百分数作为评判对神经系统影响的指标。2.自发活动计数：小鼠自主活动记录仪是通过检测大小鼠自发的水平运动或直立运动的频度从而评价小鼠自主活动的能力。3.运动协调性：转棒式疲劳仪可做疲劳实验，骨骼肌松驰实验、中枢神经抑制实验，以及其它需用运动方式检测药物作用的实验。4.学习记忆：被动回避跳台试验和方位水迷宫是简单的学习模式,可综合反映动物的学习和记忆能力。5.体温的变化以丙泊酚为例： 从运动/感觉反射、自发活动计数、运动协调性和学习记忆四方面评价HX0507对小鼠神经系统的安全性。(一)动物:SPF级动物昆明种小鼠共207只，符合纳入标准200只。200只小鼠雌雄各半，体重18-22g，饲养于国家成都中药安全性评价中心普通动物房，实验前动物适应环境。选择健康(雌性须未孕)动物作为受试动物，雄性、雌性动物分开饲养，每笼饲养5只，饲养条件符合国标GB 14925-2001，室温21士5℃ ，相对湿度55士15%, 12小时明暗交替。动物以鼠饲料喂养，去离子水自由饮用。(二)仪器1.小鼠自主活动测试仪:仪器型号为JXDH-I，由河北冀星试验仪器公司提供。活动仪中装有定位的红外线光束，小鼠在有机玻璃格中活动可切断光束，活动仪则自动记录小鼠切断光线的次数，即记录自发活动数。2.小鼠甩尾仪:由Biological Reseach Apparatus ( Italy)公司提供。有辐射热加热点，可记录小鼠逃避热反射的时间。3.转杆仪:XZC-4B转棒式疲劳仪。调整传送带位置，按动转动按钮，转棒转动，调整疲劳仪的转速为巧转/分。提小鼠尾将小鼠放到转棒上按下清零按钮，清零后开始记时，当小鼠跌落下来后压动下踏板，记时器被锁住，显示时间为小鼠在转棒上停留的时间。4.Morris水迷宫:北京天坛公司制造，由平台、不锈钢圆形水槽、不锈钢支架，摄像机支架、摄像机及广角镜头、图像采集卡和软件等部分组成。5.其他:电子天平、秒表、Iml注射器、小鼠固定器等。(三)实验分组:根据《化学药物一般药理学研究技术指导原则》，对神经系统应“定性和定量评价给药后动物的运动功能、行为改变、协调功能、感觉/运动反射和体温等的变化”。小鼠共计207只，符合纳入标准200只。200只小鼠分为四大组。第一大组观测甩尾潜伏期第二大组观测自发活动计数第三大组观测小鼠转杆疲劳仪落下个数第四大组观测逃避潜伏期每一大组各用5O只(体温的测定在Beagle犬中进行)，雌雄各25只，随机再分为5小组，即HX0507高、中、低3个剂量组、DIPRIVAN对照组及溶剂(生理盐水)对照组，每小组10只动物。神经系统安全性离体研究 对小鼠脑组织重量的影响：脑组织脏器系数的测定：脑组织蛋白含量的测定：对小鼠脑组织脂质过氧化作用的影响：脑组织SOD活力，GSH-Px活力，MDA含量的测定 对小鼠脑组织神经递质的影响：脑组织乙酰胆碱，NO，Glu含量的测定对小鼠脑组织能量代谢的影响：脑组织SDH活性，ATPase活性的测定实验动物与分组健康小鼠48只,体重（18士2）g，雌雄各半。实验动物按照随机分组的原则，将小鼠分为对照组和实验组，剂量（高、中、低）分别为21.Omg/m3(1/24LC50) , 42.Omg/m3(1/12LC50)和84.0mg/m3(1/6LC50)。每组12只小鼠，雌雄各半。实验分组染毒方法采用静式吸入染毒，每天2h，每周6d，共染毒12w，对照组吸入新鲜空气，染毒组吸入既定浓度的甲醛。主要试剂与仪器氯化乙酞胆碱(Ach)超氧化物歧化酶(SOD)试剂盒谷肤甘肤过氧化物酶(GSH-Px )试剂盒丙二醛(MDA)试剂盒一氧化氮(NO)试剂盒谷氨酸(Glu)试剂盒琥珀酸脱氢酶(SDH)试剂盒ATP酶( ATPase)试剂盒考马斯亮蓝蛋白试剂盒752紫外光栅分光光度计电热恒温水浴