检测生物组织中的糖类脂肪和蛋白质试验课
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第三讲检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质(实验课)
eq \a\vs4\al(?对应学生用书P10?)
一、还原糖的检测
二、脂肪的检测
1.实验原理
脂肪+苏丹Ⅲ(或苏丹Ⅳ)染液―→橘黄色(或红色)
2.方法步骤
(1)方法一:花生种子匀浆+3滴苏丹Ⅲ染液→橘黄色。
(2)方法二:
结论:花生种子的子叶有脂肪存在。
三、蛋白质的检测
1.斐林试剂与双缩脲试剂比较
比较项目
斐林试剂
双缩脲试剂
成分
甲液
乙液
A液
B液
0.1 g/mL NaOH溶液
0.05 g/mL CuSO4溶液
0.1 g/mL NaOH溶液
0.01 g/mL CuSO4溶液
反应原理
含醛基的可溶性还原糖将Cu(OH)2还原为Cu2O沉淀
具有两个或两个以上肽键的化合物在碱性条件下与Cu2+反应生成络合物
添加顺序
甲、乙两液等量混匀后立即使用
先加入A液2 mL摇匀,再加3~4滴B液摇匀
反应条件
50~65℃
不需加热
反应现象
样液浅蓝色→棕色→砖红色
样液变紫色
相同点
都含有NaOH、CuSO4两种成分,且所用NaOH溶液浓度都是0.1 g/mL
2.注意事项
(1)三个实验中都不宜选取有颜色的材料,否则会干扰实验结果的颜色变化。
(2)脂肪鉴定的过程中滴加1~2滴体积分数为50%的酒精的目的是洗去浮色,原因是苏丹Ⅲ或苏丹Ⅳ染液易溶于酒精。
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