毛细管电泳-质谱联用技术.PPT

CE-MS联用仪 CE-MS联用仪的接口 CE-MS联用仪多采用ESI源。由于CE背景电解质的流量为纳升级，在通过正常ESI源喷嘴时，较难形成雾滴。因此将电喷雾离子源改为三套管式ESI源，即在流出液与喷雾气体间，增加了夹套液套管，使由CE末端的流除液，在ESI源的喷口处形成雾滴。 CE-MS缓冲液和夹套液要求 不能用非挥发性盐 浓度一般低于20 mmol/L 缓冲液 浓度一般为背景电解质溶液浓度的1/10 具体流量需测定，因样品而异 夹套液 CE-MS联用技术在医药研究中的应用 CE-MS 在药物分析中有用于药物有效成分和杂质的检测 近年来在蛋白质、多肽和脂类等生物大分子分离检测中得到了很好的应用 用于中草药及其他天然产物中活性和毒性成分分析 可用于药物及其代谢物的体内药物分析，指导临床合理用药或者监控药物滥用 参考文献 1.杭太俊. 药物分析.8版[M]. 人民卫生出版社, 2016. 2.曾苏. 药物分析学.2版[M]. 高等教育出版社, 2014. 3.张敏娟, 黄秀梅, 姜世贤. HPLC和UPLC法测定复方黄连素片中吴茱萸碱、吴茱萸次碱含量的方法比较[J]. 药物分析杂志, 2012, 32(11): 2077-2081. 4.Yilmaz B, Sahin H, Erdem A F. Determination of naproxen in human plasma by GC-MS[J]. Journal of Separation Science, 2014, 37(8):997-1003. 5.黄勇, 何峰, 郑林,等. UPLC-MS/MS法同时测定家兔血浆中6个黄酮类成分及其药代动力学研究[J]. 药物分析杂志, 2012, 32(1): 1-6. ?????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????? * * 第四节 质谱及其联用技术 质谱法是在高真空状态下将被测物质离子化，按离子的质荷比（m/z）大小分离而实现物质成分和结构分析的方法，且质谱峰强度与其代表的物质含量成正比，据此可进行定量分析。 色谱与质谱联用技术 UPLC-MS SFC-/MS 气质联用技术 质谱仪工作原理 GC-MS仪器装置 1.进样系统 直接进样：在室温和常压下，气态或液态供试品可通过一个可调喷口装置以中性流的形式导入离子源。 通过接口导入：GC-MS的接口主要有毛细管柱直接导入型接口。 GC-MS仪器装置 2.离子源 电子轰击 化学电离 快原子轰击 GC-MS仪器装置 3. 质量分析器 扇形磁场分析器 1 四极杆分析器 2 离子阱分析器 3 飞行时间分析器 4 傅里叶变换分析器 5 GC-MS仪器装置 扇形磁场分析器 单聚焦磁质量分析器 双聚焦磁质量分析器 特点：单聚焦磁质量分析器分辨率低，双聚焦磁质量分析器分辨率高。 GC-MS仪器装置 四极杆分析器 特点： 四极杆质量分析器具有重量轻、体积小、造价低廉等优点。 GC-MS仪器装置 离子阱分析器 特点： 1.单一的离子阱可实现多级“时间上”的串联质谱 2.结构简单，价格便宜 3.灵敏度高 4.质量范围大 飞行时间分析器 GC-MS仪器装置 特点：1.检测离子的质荷比范围比较宽 2.灵敏度高，适合做串联质谱的二级 3.扫描速度快，适合做研究极快过程 GC-MS仪器装置 傅里叶变换分析器 特点： 1.仪器的分辨率极高 2.高分辨率下不影响灵敏度 3.精密度非常好，能达到百 万分之几 4.具有多级质谱功能 4. 检测器与数据处理 GC-MS仪器装置 检测器通常为光电倍增器或电子倍增器，将离子流转化为电流，所采集的信号经放大并转化为数字信号，通过计算机处理后得到质谱图。 外标法 成本低 对进样要求高 内标法 操作繁琐 准确度、精确度高 选择合适的内标，采用正确的离子监测方式测定分析物与内标离子相对丰度，利用分析物和内标峰面积比或峰高比绘制校正曲线，可计算供试品中分析物的含量。 质谱定量分析 GC-MS测定人血浆中萘普生的含量 应用实例 色谱条件： 色谱柱:HP-5 MS柱(30 m ×0.25 mm id, 0.25 μm） 载气：He 流速1 ml/min 质谱条件： 溶剂延迟3 min 传输线温度：280 ℃ 电子能量：70m V 萘普生 应用实例 样品处理方法： 1 血浆样品0.5ml在室温解冻 2 0.75ml水和0.1ml内标溶液(布洛芬，1.0μg/mL)加入血浆 3