免疫组化联合抗体在腹膜间皮瘤与卵巢浆液性癌鉴别中应用.docVIP

免疫组化联合抗体在腹膜间皮瘤与卵巢浆液性癌鉴别中应用 　　摘要：目的 研究CK5/6、CK8/18、CEA、Vimentin（Vim）、Calretinin（Cal）、D2-40、ER、PR、CA125在腹膜间皮瘤与卵巢浆液性癌中的表达情况，寻找后穹隆穿刺活检标本中鉴别二者最有效的抗体组合。方法 选取我院2013年1月～2014年12月盆腔肿瘤手术标本66例，按照不同病种分为二组，卵巢低级别浆液性癌40例，腹膜上皮型恶性间皮瘤26例，采用常规HE染色观察二者形态学特点，并应用免疫组织化学SP法检测CK5/6、CK8/18、CEA、Vim、Cal、D2-40、ER、PR、CA125的表达情况。结果 上皮型恶性间皮瘤与低级别卵巢浆液性癌组织学形态极其相似，常规HE切片中鉴别非常困难。免疫组织化学显示上皮型恶性间皮瘤CK5/6、CK8/18、CEA、Vim、Cal、D2-40、ER、PR、CA125阳性率分别为100%、100%、3.8%、76.9%、85%、95.2%、3.8%、0%、7.7%；而在卵巢浆液性癌中的阳性率分别为0%、100%、87.5%、0%、0%、0%、80%、85%、95%，二者对9种抗体的阳性率差异显著。结论 CK5/6、Cal、D2-40在间皮瘤中具有较强的敏感性和特异性，而卵巢癌在ER、PR、CA125中高表达，采用形态学和免疫组化相结合的方法，对活检标本中卵巢浆液性癌和上皮型恶性间皮瘤的鉴别诊断有极大的帮助，对指导临床的准确诊断和正确治疗具有重大意义。 　　关键词：细针穿刺；卵巢癌；上皮型间皮瘤；免疫组织化学；联合抗体 　　腹膜恶性间皮瘤（PMM）与低级别卵巢浆液性癌（OSA）细胞学形态极其相似，单纯依靠组织学鉴别二者非常困难，尤其是经后穹隆盆腔肿瘤穿刺标本，由于取材困难，穿刺过程中组织损伤，诊断更加困难，只能依靠免疫组织化学方法进行鉴别诊断。目前标记间皮瘤的抗体较多，但敏感性和特异性差异很大，找到一组简单可靠的抗体组合正成为目前研究的热点。本研究选取我院2013年1月～2014年12月卵巢低级别浆液性癌40例，腹膜上皮型恶性间皮瘤26例，应用CK5/6、CK8/18、CEA、Vim、Cal、D2-40、ER、PR、CA125九种抗体对盆腔上皮型恶性间皮瘤和卵巢浆液性癌进行检测，希望找到鉴别二者较好的抗体组合。 　　1资料与方法 　　1.1一般资料 选用我院2013年1月～2014年12月盆腔肿瘤手术标本66例，其中上皮型恶性间皮瘤26例，男性17例，女性9例，16例有石棉接触史，年龄35～72岁，平均（52.8±5.6）岁。卵巢低级别浆液性癌40例，年龄40～75岁，平均（50.5±12.4）岁。 　　1.2 SP法免疫组化试剂盒来源（表1） 　　1.3方法 所有标本均经4%中性甲醛固定，常规4μm厚度连续切片，HE染色。免疫组化采用SP法，严格按照使用说明书操作，DAB显色，苏木精复染、脱水、透明和封固。以PBS代替一抗作为阴性对照。 　　1.4结果判定 免疫组化染色阳性信号呈棕褐色或棕黄色，ER、PR定位在细胞核；CK5/6、CK8/18、Cal、Vim定位在细胞浆；D2-40、CEA、CA125定位在细胞浆/膜，阳性细胞数10%为阴性，≥10%为阳性。 　　2结果 　　2.1病理组织学形态 40例卵巢癌病例均为低级别浆液性癌，呈腺管状、乳头状排列，瘤细胞单层或复层，呈矮柱状或立方型，相似于间皮细胞，乳头结构较宽，可见多级分枝，有的间质内可见砂粒体（图1，图2）。26例上皮型恶性间皮瘤光镜下组织结构多样，表现为管状、乳头状、实性巢状等（图3）。细胞圆形或卵圆形，核通常为单个，居中或稍偏位，核仁1～2个，核分裂像少见，少数病例可伴有砂粒体形成。上皮型恶性间皮瘤在CK5/6、Cal、D2-40中高表达（图4～图6），而卵巢癌在ER、PR、CA125中高表达（图7～图9）。 　　2.2免疫组化表达情况（表2） 　　3讨论 　　盆腔肿瘤中，腹膜恶性间皮瘤和卵巢癌为最常见的2种肿瘤，由于组织来源不同，治疗方法也不相同，因此组织学的分型对指导临床的治疗、肿瘤的分期及预后的判断有着重要的意义。有文献报道恶性间皮瘤90%发生于胸膜[1]，3%～12%发生于腹膜[2]。 　　腹膜间皮瘤是腹腔内恶性度极高的肿瘤，目前尚无有效的治疗方法，大多数死于诊断后的1～2年内，男性发病多于女性，发生于儿童的病例罕见报道[3]。根据国内资料统计，间皮瘤的发病率为0.04%，且多与石棉接触有关[4]，其他原因包括职业和周围环境的接触[5]。近年其发病率有逐年增多的趋势。有研究表明，恶性间皮瘤的潜伏期为35～40年[6]，目前发病率增高的原因，可能与20世纪70年代我国大面积手纺石棉加工有关。 　　由于