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扬子毛茛的传粉研究 　　摘 要 毛茛科（Ranunculaceae）属于真双子叶植物分支的原始类群，它的雌蕊群拥有离生心皮，而在毛茛属（Ranunculus）植物内一个雌蕊群内的心皮数可以达到几十个。前人的研究表明，具有离生心皮雌蕊群的植物，其繁殖?Y果会受到柱头授粉均一性的影响，而这一影响会很大地妨碍这些植物的后代延续。毛茛科毛茛属植物虽然具有多离生心皮雌蕊群，但是它们的有性繁殖能力却非常强大。本研究以毛茛属的一种植物扬子毛茛（Ranunculus sieboldii）为实验对象，通过观察它的传粉过程，花粉管生长过程以及结实情况，旨在弄清扬子毛茛的繁殖结构特点与传粉者活动对于结实率的影响，从而探索这类离生心皮雌蕊群植物的繁殖保障机制。 　　关键词 传粉 结实率 离生心皮雌蕊群 扬子毛茛 　　中图分类号：R284.1 文献标识码：A 　　在被子植物的繁殖中，传粉过程处于十分重要的地位，它直接影响了植物后代的产生。对于具有多心皮雌蕊群的植物而言，心皮离生会造成传粉过程中花粉在柱头间分配不均，使得同一雌蕊群内到达胚珠的花粉管也会出现差异，进而导致结实率下降。在自然状态下植物如何保证花内柱头的高授粉率以及当柱头授粉率不能保障的情况下如何产生足够多的具有竞争力的子代是非常值得关注的问题。在双子叶多心皮植物鹅掌楸（ Liriodendron chinense）中的研究表明，其雌蕊群中的低授粉率直接导致了低结实率。而单子叶多心皮类群泽泻科中，结实率高于柱头授粉率则是另一种更为值得注意的事实：自然状态下，小慈姑（Sagittaria potamogetifola）的柱头授粉率为80%～85%，结实率却接近100%，进一步研究发现，“花粉管再分配” 作为一种繁殖保障机制在其中起着重要作用。此外，闭花授粉通常被认为是一种提高传粉效率的机制，因而是保障有性生殖成功的另一途径。 　　毛茛科属于真双子叶植物分支的原始类群，它的雌蕊群拥有离生心皮，而在毛茛属植物内一个雌蕊群内的心皮数可以达到几十个。虽然毛茛属植物的雌蕊群也拥有大量的离生心皮，但是这些植物的结实率却并不低，这说明在毛茛属植物内，可能存在一些繁殖保障机制，通过这些机制，它们避免了离生心皮雌蕊群的繁殖缺陷。本研究通过选取一种在华中地区大量分布的毛茛属植物扬子毛茛为研究对象，通过研究它的繁殖结构和繁殖过程，来弄清扬子毛茛的繁殖结构特点与传粉者活动对于结实率的影响，从而探索这种离生心皮雌蕊群植物的繁殖保障机制。 　　1材料与方法 　　1.1昆虫访花行为的观察 　　在实验区域中确定20朵花进行观察，以每15min为一个时间统计单位，记录访花昆虫种类，用数码相机进行拍照，并记录不同昆虫访花时间以及昆虫在花朵上的停留区域和行为。 　　1.2扬子毛茛柱头落粉率和花粉管生长观察 　　在晴朗的天气下，在两个不同的居群中随机选取100个花苞，一直到这些花凋谢，选取45朵从花开放到花瓣凋谢一直处于晴朗天气下的花，将它的整个雌蕊群剥离下来，用冰盒储存，立即转移至室内。然后在解剖镜下对这些雌蕊群进行观察，统计落有花粉的雌蕊群个数，计算它们占总数的百分比。另在这些雌蕊群中随机选取20个落有花粉的个体，对每个雌蕊群上所有柱头进行显微观察，记录落有花粉的柱头数，并计算落粉柱头占每个雌蕊群总柱头的百分比。然后再选取5个落有花粉的雌蕊群，将它们的所有雌蕊全部剥离并混合在一起，从这些雌蕊中随机选取50个用卡诺固定液（75%无水乙醇加25%冰乙酸）固定24小时后，在显微镜下用明场观察它们的柱头，记录每个柱头上的花粉数目，计算平均数。 　　在一个扬子毛茛居群中选取10个不同的植株，对60个花苞进行套袋，待花开放后进行人工异花授粉，为保证实验结果不受昆虫传粉的影响，授粉后仍旧套袋，于授粉后12h回收花朵，将花被和雄蕊群去除后，用FAA固定雌蕊群24小时以上。固定材料经过2%NaOH透明2h，然后进行徒手切片，经过蒸馏水洗后，再放置在苯胺蓝染液中染色3小时，然后取出材料再经过蒸馏水洗后置于Olympus荧光显微镜下用紫外激发光进行观察，主要观察花粉的萌发情况和花粉管在雌蕊中的生长情况。 　　1.3扬子毛茛结实情况统计 　　在同一个居群中，选取10个处于花蕾期的植株分为两组，对第一组5个植株的花苞进行套袋处理，待花开放后授以异株花粉，然后继续套袋知道所有花的花瓣全部凋谢，然后取下袋子待果实成熟；第二组5个植株的花苞不做任何处理，在自然状态下等所有花转变成为成熟果实。然后先以植株为单位，统计植株结实的百分比，然后从各组中分别选取20个成熟的果实，将所有小果进行剥离，在体视显微镜下统计每个果实上为发育心皮的数目和成熟小果的数目，然后计算成熟小果数与原先雌蕊群总心皮数的比值，作为每朵花的结实率。 　　2结果与分析