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1.半不连续性:DNA复制过程中,一条链是连续复制,另一条链是不连续复制的现象 几个重要概念 3. 随从链: 链的延长方向(5’?3’)与解链方向相反,为不连续复制 2.领头链:链的延长方向(5’? 3’)与解链方向 相同, 为连续复制 逆转录现象和逆转录酶 逆转录:RNA指导下的DNA合成作用,以RNA为模板在逆转录酶催化下,由dNTP聚合成DNA的作用,新生DNA分子存有RNA基因组的信息 逆转录酶:又称为反转录酶,为依赖RNA的DNA聚合酶 逆转录酶是多功能酶,有三种酶活性: 1. 逆转录活性:即以RNA为模板合成DNA 2. RNase活性:水解RNA:DNA中的RNA 3. DNA pol活性:以DNA为模板合成DNA 特点:无外切酶活性,转录错误率高2×10-4 DNA的损伤和修复 修复 (repairing):是指针对已发 生的缺陷而进行的补救机制。 (一)、错配修复 原核细胞内存在Dam甲基化酶,能使位于5`GATC序列中腺苷酸的N6位甲基化。 复制后DNA在短期内(数分钟)为半甲基化的GATC序列,一旦发现错配碱基,即将未甲基化链切除一段包含错误碱基的序列,并以甲基化的链为模板进行修复。 (二)直接修复 生物体内存在多种DNA损伤以后而并不需要切除碱基或核苷酸的机制,这种修复方式称为DNA的直接修复。 紫外线照射后可使DNA分子中同一条链两相邻T碱基之间形成二聚体( TT )。 DNA紫外线损伤的光复合酶修复 1、形成嘧啶二聚体 2、光复合酶结合于 损伤部位 3、酶被可见光激活 4、修复后酶被释放 (三)切除修复 (四、重组修复) 遗传信息有缺损的子代DNA分子通过遗传重组的方式加以弥补,即从同源DNA的母链上将相应核苷酸序列片段移至子链缺口处,然后用再合成的序列来补上母链的空缺。 (五)、应急反应(SOS)和易错修复 SOS反应:细胞DNA受到损伤或复制系统受到抑制的紧急情况下,为求得生存而出现的应急效应。 SOS反应诱导的修复系统包括避免差错修复和易产生差错修复 * 由许多有固定起点的 独立的复制元完成复制双向复制 Unwinding DNA from nucleosomes: 50 bp/sec, need helicases and replication protein A (RP-A) * 嘌呤核苷酸的合成(利用同位素标记可知) N N C 1 2 3 5 4 7 6 8 9 CO2 Asp:天门冬氨酸 一碳单位 Gln 甘氨酸:4.5.7位碳 一碳单位 N5,N10-次甲基四氢叶酸 1.嘌呤核苷酸的生成:不是先合成嘌呤碱,再与核糖和磷酸合成核苷酸,而是从5-磷酸核糖焦磷酸开始,经一系列反应,生成次黄嘌呤核苷酸,然后再转变为其他嘌呤核苷酸 次黄嘌呤核苷酸——腺嘌呤; 次黄嘌呤核苷酸——黄嘌呤核苷酸——鸟嘌呤。 5-磷酸核糖焦磷酸(PRPP)是核糖的活化形式,由核糖-5-磷酸与ATP在核糖磷酸焦磷酸激酶催化下生成。 嘧啶核苷酸的合成 CO2 Gln Asp 2.嘧啶核苷酸的生成: 氨甲酰磷酸与天冬氨酸——氨甲酰天冬氨酸——与磷酸核糖合成为乳清核苷——尿嘧啶核苷酸 其他嘧啶核苷酸由尿嘧啶核苷酸转化(在尿嘧啶核苷三磷酸水平上进行的)而成 三、DNA的生物合成 现代生物学已充分证明,DNA是生物遗传的主要物质基础。生物机体的遗传信息以密码的形式编码在DNA分子上,表现为特定的核苷酸排列顺序,并通过DNA复制、转录、翻译等形式由亲代传递给子代,使后代表现出与亲代相似的性状。 复制:就是指以原来的DNA分子为模板合成出相同分子的过程 转录:就是在DNA分子合成出与其核苷酸顺序相对就的RNA的过程。 翻译:是在RNA的控制下,根据核酸链上每三个核苷酸决定一个AA的三联体密码规则,合成出具有特定AA顺序的蛋白质肽链的过程。 中心法则 Central Dogma RNA DNA 蛋白质 转录 翻译 复制 逆转录 少数病毒复制 翻译 蛋白质(病毒) (一)DNA的半保留复制 1.复制的起始点、方向和方式 亲代DNA开链,复制起始点呈叉型移动 复制叉 亲代DNA 分子 3’ 5’ 3’ 5’ 复制起始点(ori):DNA复制要从DNA分子的特定部位开始,此部位称复制起始点 ????原核和质粒:一个起始点????真核:多个起始点 ori 真核生物(Eukaryote) : 多复制起点 即--一个genome中有多个复制单位 复制眼概念 环状DNA的复制眼形成θ结构 (1) 单双向复制取决于起点处有一个还是两个复制叉 单向复制 双向复制(大多数生物) 复
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