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科技探索之路： 基础理论和技术发展催生了基因工程 早期基础理论 艾弗里证明DNA是主要遗传物质，DNA可 从一种生物个体转移到另一种生物个体。 科技探索之路： 基础理论和技术发展催生了基因工程 早期基础理论 沃森、克里克提出DNA的双螺旋结构模型。 科技探索之路： 基础理论和技术发展催生了基因工程 早期基础理论 梅塞尔松、斯塔尔证明DNA的半保留复制 科技探索之路： 基础理论和技术发展催生了基因工程 早期基础理论 克里克等提出中心法则 DNA RNA 蛋白质 转录 翻译 逆转录 复制 科技探索之路： 基础理论和技术发展催生了基因工程 早期基础理论 1963年尼伦伯格和马太破译编码氨基酸的 遗传密码，1966年霍拉纳用实验加以证明。 科技探索之路： 基础理论和技术发展催生了基因工程 1)基因转移载体的发现 2)工具酶的发现 3)DNA合成和测序技术的发明 4)DNA体外重组的实现 5)重组DNA表达实验的成功 6)第一例转基因动物问世 7)PCR技术的发明 * * 选修3.专题一： 基因工程的产物： 多彩小鱼 转基因小鼠 转基因小猪 蓝色妖姬 黑籽番茄 转基因金大米 基因工程的应用： 2005年全世界约有糖尿病患者1.8亿,我国约6000万。 治疗糖尿病特效药——胰岛素。 每100kg 猪或牛的胰腺中仅可提取4~~5g。 1979年，美国将人的胰岛素基因重组到大肠杆菌内， 实现了细菌生产胰岛素，大大降低了生产成本。 DNA(基因)　　　mRNA 蛋白质(性状) 转录 翻译 思考：基因的表达过程,与密码子的哪一特性有关？ 密码子在生物界是　　　的！ 通用 基因工程的概念： 基因工程，又叫DNA重组技术。通俗的说，就是按照人们的意愿，把一种生物的某种基因提取出来，加以修饰改造，然后放到另一种生物的细胞里，定向 地改造生物的遗传特性。 基因工程别称 操作环境 操作对象 操作水平 基本过程 DNA重组技术 生物体外 基因 DNA分子水平 剪切 → 拼接 → 导入 → 表达 工具 问题探讨： 苏云金芽孢杆菌含有一种可以合成毒蛋白的基因。 让细菌的毒蛋白基因在棉花细胞中表达，可培育出抵抗棉铃虫害的抗虫棉。 普通棉花　　抗虫棉 想一想：完成抗虫棉的培育，需要哪些关键工作？ 基因工程培育抗虫棉的简要过程： 普通棉花(无抗虫特性) 提取 抗虫基因 通过运载体导入 转基因棉花含抗虫基因 转基因棉花有抗虫特性 苏云金芽孢杆菌 转基因棉花产生伴胞晶体 思考：在以上过程中关键步骤是什么？ 基因工程培育抗虫棉的关键步骤： 关键步骤一： 抗虫基因从苏云金芽孢杆菌细胞内提取出来 关键步骤二： 抗虫基因与棉花DNA“缝合” 关键步骤三： 抗虫基因导入棉花细胞 “分子手术刀”—— 限制性核酸内切酶 “分子缝合针”—— DNA连接酶 “分子运输车”——载体 一、限制性核酸内切酶——“分子手术刀” 1 来源：限制性核酸内切酶，又称限制酶 主要从原核生物中分离纯化。 2 作用特点：识别特定核苷酸序列，使每条链中 特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开。 （大多数限制酶的识别序列由6个核苷酸组成 少数的识别序列由4、5或8个核苷酸组成） 3 作用结果：使目的基因两端和运载体产生黏性末端或平末端。 思考：限制酶在原核生物细胞中的作用？ 1. 种类与命名 现在已经从约300种微生物中分离出了约4000 种限制性内切酶(限制酶)。 粘质沙雷氏杆菌 （Serratia marcesens） SmaⅠ 大肠杆菌 （Escherichia coli R） EcoRⅠ 命名方法 1. 作用特点——断开磷酸二酯键 磷酸二酯键 T 1 2 3 4 5 A 1 2 3 4 5 H H H H HO T 1 2 3 4 5 A 1 2 3 4 5 H H H H O H2O + 磷酸二酯键 神 图! 1. 限制酶作用特点——断开磷酸二酯键 限制酶 DNA解旋酶 区别 限制性内切酶与DNA解旋酶的区别 切割特定的核苷酸序列的磷酸二酯键 将DNA两条链的氢键打开形成两条单链 限制酶 DNA水解酶 区别 限制性内切酶与DNA水解酶的区别 切割特定核苷酸序列的磷酸二酯键，形成DNA的片段. 切割DNA的所有磷酸二酯键，形成单个的脱氧核苷酸 1. 作用特点——断开磷酸二酯键 限制酶的识别序列——回文序列 回文序列： 在切割部位，一条链正向读的碱基顺序与另一条链反向读的顺序完全一致。 1. 作用特点——断开磷酸二酯键 　 EcoRⅠ 黏性末端　　　　 黏性末端 1. 作用特点——断开磷酸二酯键 SmaⅠ 平末端 　　　平末端 二、“分子缝合针” —— DNA连接酶 1 种类 ： ⑴ E·co