高一实验二还原糖脂肪、蛋白质的鉴定.docVIP

高一生物 实验二 生物组织中还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定 实验点拨 1、生物学中物质的鉴定与化学中物质的鉴定,其原理是一致的。化学中被鉴定的物质与所用的化学试剂要么发生颜色反应,要么产生沉淀, 在生物学中物质鉴定的理念是:某些化学试剂能够使生物组织中的有关有机化合物产生特定的颜色反应. ①可溶性还原糖+ 斐林试剂→砖红色沉淀.(水浴加热)②脂肪小颗粒 + 苏丹Ⅲ染液→橘黄色小颗粒.(要显微镜观察)③蛋白质 + 双缩脲试剂→紫色反应.(要先加A液NaOH 溶液再加B液CuSO4 溶液) 2、可溶性还原糖的鉴定实验中：应选择含糖量较高,颜色为白色或近白色的植物组织。 以苹果,梨为最好。且先要制备组织样液。研磨时，可加石英砂和水一起研磨。 3、斐林试剂要两液混合均匀且现配现用，切勿将甲液和乙液分别加入组织样液中。 斐林试剂的配制过程示意: 斐林试剂甲液　( 0.1 g/ml的 NaOH 溶液) 斐林试剂乙液　( 0.05 g/ml的 CuSO4 溶液) 4.关于鉴定还原糖的实验，在加热试管中的溶液时，应该用试管夹夹住试管上部，并放入盛开水的大烧杯中加热。注意试管底部不要接触烧杯底部，同时试管口不要朝向实验者，以免试管内溶液沸腾时冲出试管，造成烫伤。如果试管内溶液过于沸腾，可以上提试管夹，使试管底部离开大烧杯中的开水。　　5.做鉴定还原糖的实验时，在鉴定之前，可以留出一部分样液，以便与鉴定后的样液的颜色变化作对比，这样可以增强说服力。 6、脂肪的鉴定实验中：实验材料应选择富含脂肪的种子,以花生种子为最好。实验前浸泡3h～4h（浸泡时间太短，不容易切片；浸泡时间过长，组织太软，切下来的薄片不易成形），最适宜切片。 7、实验中学生应分工合作。在“还原糖的鉴定”实验中，当每组两个学生中的一个制备生物组织样液时，另一个学生可以用酒精灯将水煮开，以便缩短实验的等待时间。在“脂肪的鉴定”实验中，一个学生制作临时装片时，另一个学生则可以调试显微镜。另外，在完成前两个实验时，一个学生洗刷试管、清洗玻片和整理显微镜，另一个学生则可以进行后一个实验的操作。 8、蛋白质的鉴定实验：可用浸泡1d～2d的黄豆种子(或用豆浆,或用鸡蛋蛋白稀释液).　　9、双缩脲试剂的使用,一定要先加入A液(即0.1 g/ml的 NaOH 溶液),再加入双缩脲试剂B液(即0.01 g/ml的 CuSO4 溶液).　　10、还可设计一只加底物的试管,不加双缩脲试剂,进行空白对照,说明颜色反应的引起是蛋白质的存在与双缩脲试剂发生反应,而不是空气的氧化引起. 实验报告 ［提出问题］ 怎样鉴定生物组织中的还原糖？斐林试剂怎样配制和使用？ 选材；制备组织样液；取组织样液；加斐林试剂 (由斐林试剂甲液和乙液充分混合而成,不能分别加入)；水浴加热；观察溶液颜色变化：浅蓝色→棕色→砖红色.结论:还原糖与斐林试剂在加热煮沸的过程中生成砖红色沉淀 脂肪的鉴定实验中，如何观察？若有脂肪，可观察到什么现象？ 取材；切片；滴苏丹Ⅲ染液染色、去浮色、制成临时装片；观察：先在低倍镜下,找到材料的脂肪滴,然后,转为高倍镜观察.结论：细胞中的圆形脂肪小颗粒已经被染成橘黄色. 蛋白质的鉴定使用什么试剂？与斐林试剂相比有哪些相同点和不同点？ 双缩脲试剂；斐林试剂和双缩脲试剂的比较相同点:①都由NaOH溶液和CuSO4溶液构成;②斐林试剂甲液和双缩脲试剂A都为0.1g/mL NaOH溶液.不同点:①CuSO4溶液浓度不一样:斐林试剂乙液为 0.05 g/mLCuSO4溶液,双缩脲试剂 B为 0.01g/mLCuSO4溶液.②配制比例不一样.③使用方法不一样:斐林试剂是甲,乙液一起混合后再使用,双缩脲试剂则是先向待鉴定材料加入A试剂摇匀后,再加入试剂B.④鉴定的对象不一样:斐林试剂鉴定的是还原糖,双缩脲试剂鉴定的是蛋白质.⑤反应本质及颜色反应不一样. ［用品准备］1.可溶性还原糖的鉴定实验:选择含糖量较高,颜色为白色或近白色的植物组织,以苹果,梨为最好.2.脂肪的鉴定实验:选择富含脂肪的种子,以花生种子为最好(实验前浸泡3h～4h).3.蛋白质的鉴定实验:可用浸泡1d～2d的黄豆种子(或用豆浆,或用鸡蛋蛋白).4.仪器:剪刀,解剖刀,双面刀片,试管,试管架,试管夹,大小烧杯,小量筒,滴管,玻璃漏斗,酒精灯,三脚架,石棉网,火柴,研钵,石英砂,纱布,载玻片,盖玻片,毛笔,吸水纸,显微镜.5、试剂：①斐林试剂(0.1g/L的NaOH溶液+ 0.05g/mL的CuSO4溶液);②苏丹Ⅲ染液;③双缩脲试剂;④ 体积分数为50%的酒精溶液;⑤蒸馏水. ［探究过程］ 可溶性还原糖 脂肪 蛋白质 原 理 与斐林试剂反应生成砖红的沉淀 被苏丹Ⅲ染液染成橘黄色（或被苏丹Ⅳ染成红色） 与双缩脲试