第十四章 DNA的生物合成 DNA Biosynthesis ( Replication ).ppt

原核生物的转录过程 The Process of Transcription in Prokaryote 第二节 RNA聚合酶必须准确地结合在转录模板的起始区域。 DNA双链解开，使其中的一条链作为转录的模板。 一、转录起始需要RNA聚合酶全酶 转录起始需解决两个问题： 起始形成闭合转录复合体 双链DNA局部解开形成开放转录复合体 磷酸二酯键形成 终止阶段 解链区到达基因终点 延长阶段 5? 3? ? ? RNA 终止子(terminator) 5? ? RNA聚合酶 ? 5? ? 3? 5? ? 3? 5? 5? 3? ? 离开 启动子, 2. DNA双链局部解开，形成开放转录复合体； 1. RNA聚合酶全酶(?2????)与模板结合，形成闭合转录复合体 ； 3. 在RNA聚合酶作用下发生第一次聚合反应，形成转录起始复合物： 5?-pppG -OH + NTP ? 5?-pppGpN - OH 3? + ppi 转录起始过程： 第一个磷酸二酯键生成后，σ亚基即从转录起始复合物上脱落，核心酶连同四磷酸二核苷酸，继续结合于DNA模板上，酶沿DNA链前移，进入延长阶段。 二、 原核生物的转录延长时蛋白质的翻译也同时进行 1. ?亚基脱落，RNA–pol聚合酶核心酶变构，与模板结合松弛，沿着DNA模板前移； 2. 在核心酶作用下，NTP不断聚合，RNA链不断延长。 (NMP) n + NTP ?? (NMP) n+1 + PPi 5? 3? DNA 原核生物转录过程中的羽毛状现象 核糖体 RNA RNA聚合酶 在同一DNA模板上，有多个转录同时在进行； 转录尚未完成，翻译已在进行;即转录、翻译同时进行 这种形状说明： 依赖Rho 因子的转录终止 非依赖Rho因子的转录终止 三、原核生物转录终止分为依赖ρ(Rho)因子与非依赖ρ因子两大类 转录终止指RNA聚合酶在DNA模板上停顿下来不再前进，转录产物RNA链从转录复合物上脱落下来。 依据是否需要蛋白质因子的参与，原核生物转录终止分为： （一）依赖ρ因子的转录终止 富含C的RNA序列 （二） 非依赖 Rho因子的转录终止 DNA模板上靠近终止处，有些特殊的碱基序列，转录出RNA后，RNA产物形成特殊的发夹结构来终止转录。 5`UUGCAGCCUGACAAAUCAGGCUGAUGGCUGGUGACUUUUUAGUCACCAGCCUUUUU... 3` 5`UUGCAGCCUGACAAAUCAGGCUGAUGGCUGGUGACUUUUUAGUCACCAGCCUUUUU... 3` RNA 5?TTGCAGCCTGACAAATCAGGCTGATGGCTGGTGACTTTTTAGTCACCAGCCTTTTT... 3? DNA UUUU...… UUUU...… 5`UUGCAGCCUGACAAAUCAGGCUGAUGGCUGGUGACUUUUUAGUCACCAGCCUUUUU... 3` 近终止区的转录产物形成发夹(hairpin)结构是非依赖ρ因子终止的普遍现象。 真核生物的转录过程 第三节 一、 真核生物有三种DNA依赖性RNA聚合酶 真核生物具有3种不同的RNA聚合酶: RNA聚合酶Ⅰ（RNA PolⅠ） RNA聚合酶Ⅱ（RNA PolⅡ） RNA聚合酶Ⅲ（RNA Pol Ⅲ） 真核生物的RNA聚合酶 二、转录起始需要启动子 、RNA聚合酶和转录因子的参与 （一）转录起始前的上游顺式作用元件是启动子核心序列 不同物种、不同细胞或不同的基因，转录起始点上游可以有不同的DNA序列，但这些序列都可统称为顺式作用元件。 顺式作用元件包括启动子、启动子上游元件和增强子等序列。 起始点上游多数有共同的TATA序列，称为Hognest盒或TATA盒(TATA box)。通常认为这就是启动子的核心序列。 TATA 盒类似于原核生物的-10区域，共有序列为：TATAAAA 转录起始点 TATA盒 增强子 顺式作用元件 AATAAA 切离加尾 转录终止点 修饰点 外显子 翻译起始点 内含子 （二） 转录因子 能直接、间接辨认和结合转录上游区段DNA序列的蛋白质，统称为反式作用因子，现已发现数百种。 反式作用因子中，直接或间接结合RNA聚合酶的，则称为转录因子。 （三） 真核生物转录的起始 真核生物RNA-pol不与DNA分子直接结合，而需依靠众多的转录因子，形成转录起始复合物(pre-initiation complex, PIC) 。 PIC的形成 三 、真核生物转录延长过程中没有转录与翻译同步的现象 真核生物转录延长过程与原核生物大致相似，但因有核膜相隔，没有转录与翻译同步的现象。 RNA-pol前移处处都遇上核小