马尾松毛虫腺苷酸转移酶基因地克隆与分析.docVIP

PAGE 2894 中 国 农 业 科 学 41卷 9期 翁宏飚等：马尾松毛虫腺苷酸转移酶基因的克隆与分析 PAGE 2893 中国农业科学 2008,41(9):2889-2894 Scientia Agricultura Sinica doi: 10.3864/j.issn.0578-1752.2008.09.043 收稿日期：2006-12-26；接受日期：2007-06-04 基金项目：浙江省科技厅重点计划项目（2004C22037） 作者简介：翁宏飚（1970-），男，浙江衢州人，副研究员，博士，研究方向为昆虫遗传学。Tel：0571E-mail： HYPERLINK mailto:wenghb2006@126.com wenghb2006@126.com。通讯作者孟智启（1953-），男，浙江杭州人，研究员，研究方向为昆虫分子生物学。Tel：0571E-mail：cssswjsz@ 马尾松毛虫腺苷酸转移酶基因的克隆与分析 翁宏飚1，牛宝龙1，何丽华1，沈卫锋1，王守先1，2，吾中良3，蒋 平3，孟智启1 （1浙江省农业科学院蚕桑研究所昆虫分子生物学实验室，杭州 310021；2浙江林学院，浙江临安 311300；3 浙江省林业有害生物防治检疫局，杭州 310020） 摘要：【目的】克隆马尾松毛虫腺苷酸转移酶基因。【方法】采用RACE方法克隆基因，利用软件分析推导蛋白的保守结构域，并与已报道的其它8种昆虫腺苷酸转移酶进行比较，并构建系统树，用southern法分析该基因在单倍体基因组中的拷贝数。【结果】获得马尾松毛虫腺苷酸转移酶基因全长cDNA（GenBank登录号：EF194157），该基因无内含子，在烟草天蛾(M. sexta)、棉铃虫（H. armigera）、家蚕（B. mori）蜜蜂(A. mellifera)、绿蝇( L. cuprina)、果蝇(D. melanogaster )、蚊子(A. gambiae) 等昆虫间高度保守。基因组酶切后呈单一Southern杂交带。【结论】马尾松毛虫松毛虫腺苷酸转移酶基因高度保守，在基因组中单拷贝存在。 关键词：松毛虫；腺苷酸转移酶；克隆 Cloning and Primary Study of Adenine Nucleotide Translocase Gene in Dendrolimus puntatus WENG Hong-biao1, NIU Bao-long1, HE Li-hua1, SHEN Wei-feng1, WANG Shou-xian1,2, WU Zhong-liang3, JIANG Ping3, MENG Zhi-qi1 (1Laboratory of Entomo-Molecular Biology, Zhejiang Academy of Agricultural Sciences, Hangzhou 310021; 2Zhejiang Forestry University, Lin’an 311300, Zhejiang; 3Forest Pest Control and Quarantine Burean of Zhejiang Province, Hangzhou 310020) Abstract: 【Objective】 A complementary DNA clone encoding the adenine nucleotide translocases in Dendrolimus puntatus has been identified. 【Method】 RACE (Rapid Amplification of cDNA Ends) method was used to get the complete cDNA sequence. The sequence was analyzed with software. 【Result】The full length of adenine nucleotide translocases cDNA was cloned. (GenBank accession number: EF194157). The sequence contains a single open reading frame that encodes a polypeptide 300 amino acids in length. This polypeptide shows ext