朗伯-比尔定律T.pptVIP

?????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????? * * 仪器分析 供药学类、中药学类、制药工程及相关专业使用 全国普通高等中医药院校药学类专业“十三五”规划教材（第二轮规划教材） 第三章 紫外-可见分光光度法 目 录 第三章 紫外-可见分光光度法 第二节 Lambert-Beer定律 一、Lambert-Beer定律 二、吸光度的加合性 三、偏离Beer定律的因素 四、测量条件的选择 一、朗伯-比尔定律 透光率 （透射比）Transmittance 透光率定义： T 取值为 0.0 % ~ 100.0 % 全部吸收 T = 0.0 % 全部透射 T = 100.0 % 一、朗伯-比尔定律 T ： 透光率 A： 吸光度 1760年，Lambert发现，如果溶液的浓度一定，则光的吸收程度与液层厚度成正比1852年，Beer发现当单色光通过液层厚度一定的有色溶液时，溶液的吸光度与溶液的浓度成正比 吸光液层的厚度l，光程，cm c 吸光物质的浓度: g/L, mol/L K 比例常数 入射光波长 物质的性质 温度 取值与浓度的单位相关 c：mol / L K ? ? 摩尔吸光系数 c：g / 100 mL K ? 百分吸光系数 相互关系 一、朗伯-比尔定律 将精制的纯品氯霉素（M = 323.15）配制100 mL含有2.00 mg的溶液，用1.00 cm厚的吸收池，在λmax为278 nm下测得溶液的透光度为24.3%，求出氯霉素的 ε 和 。 解： 一、朗伯-比尔定律 A C 吸光定律 A或? ? 吸收光谱 A ? C ? max 三维谱图 吸收定律与吸收光谱的关系 多组分体系中，如果各组分之间无相互作用，其吸光度具有加和性，即 吸光度的加和性，是多组分定量分析的理论依据。 二、吸光度的加合性 主要原因 1.与样品溶液有关的因素 2.与测量仪器有关的因素 三、偏离比尔定律的主要因素 三、偏离比尔定律的主要因素 吸光质点间相互作用引起的对吸光定律的偏离 质点间的静电作用 质点间的缔合、解离等 质点间的化学反应 1.与样品溶液有关的因素 三、偏离比尔定律的主要因素 2.与测量仪器有关的因素---非单色光 设入射光由 ?1 和 ?2 两种波长组成，溶液的吸光质点对两种波长的光的吸收均遵从吸收定律 A或? ? 三、偏离比尔定律的主要因素 2.与测量仪器有关的因素---非单色光 分析谱带的选择 结论： 选择较纯单色光（Δλ↓，单色性↑） 选λmax作为测定波长（Δε↓，A-c线性越好） 四、测量条件的选择 检测波长的选择 适宜吸光度范围的选择 仪器狭缝宽度的选择 四、测量条件的选择 无干扰，选择 ?max 有干扰 A ? A ? 1.非单色光影响小 2.灵敏度高 1.检测波长的选择 吸收最大、干扰最小 四、测量条件的选择 2.适宜吸光度范围的选择 适宜测量范围 T : 50% ~ 20% A: 0.３ ~ 0.7 ? 测定结果相对误差较小2% 四、测量条件的选择 3.仪器狭缝宽度的选择 测量吸光度随狭缝宽度的变化，狭缝的宽度在一个范围内，吸光度是不变的。在不减小吸光度时的最大狭缝宽度，即是所欲选取的合适的狭缝宽度。 ?????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????? * *