原创力文档- 1、原创力文档（book118）网站文档一经付费（服务费），不意味着购买了该文档的版权，仅供个人/单位学习、研究之用，不得用于商业用途，未经授权，严禁复制、发行、汇编、翻译或者网络传播等，侵权必究。。
- 2、本站所有内容均由合作方或网友上传，本站不对文档的完整性、权威性及其观点立场正确性做任何保证或承诺！文档内容仅供研究参考，付费前请自行鉴别。如您付费，意味着您自己接受本站规则且自行承担风险，本站不退款、不进行额外附加服务；查看《如何避免下载的几个坑》。如果您已付费下载过本站文档，您可以点击 这里二次下载。
- 3、如文档侵犯商业秘密、侵犯著作权、侵犯人身权等，请点击“版权申诉”（推荐），也可以打举报电话：400-050-0827(电话支持时间：9:00-18:30)。
- 4、该文档为VIP文档，如果想要下载，成为VIP会员后，下载免费。
- 5、成为VIP后，下载本文档将扣除1次下载权益。下载后，不支持退款、换文档。如有疑问请联系我们。
- 6、成为VIP后，您将拥有八大权益，权益包括：VIP文档下载权益、阅读免打扰、文档格式转换、高级专利检索、专属身份标志、高级客服、多端互通、版权登记。
- 7、VIP文档为合作方或网友上传，每下载1次， 网站将根据用户上传文档的质量评分、类型等，对文档贡献者给予高额补贴、流量扶持。如果你也想贡献VIP文档。上传文档
查看更多
第三章
基因⼯程基本技术
3.1 核酸的制取技术
3.2 核酸和蛋⽩的分离-凝胶电泳
3.3 核酸和蛋⽩的检测-分⼦杂交
3.4 核酸的序列分析
3.5 ⺫的基因扩增-PCR技术
3.6 细菌的转化
基因⼯程的基本流程
产物
Products
载体
Vectors
发酵
Fermentation
DNA (RNA)
PCR Treat with
restriction enzymes
限制性内切酶
Link DNA and vector
Clonable DNA
转化Transformation
亚克隆Subcloning
基因⼯程发展所依赖的基本技术
★⼤肠杆菌的遗传转化 （转）
Genetic transformation of E.coli
★DNA分⼦的剪切和连接 (切和连）
Cutting and joining DNA fragment
★剪切和连接反应的监控
Monitoring the cutting and joining reaction
★重组结果的检出 （检）
Detection of the recombinants
基因⼯程常⽤技术－分⼦克隆⽅法
(⼀) 分⼦克隆⽅法
1. 核酸提取技术
分三⼤部分 2. 克隆
3. DNA扩增（PCR)
4. 克隆基因表达
基因⼯程常⽤技术－⼯具
（⼆）研究基因和基因活动的⼯具
1. 核酸和蛋⽩的定性定量，如紫外测定
2. 分⼦分离，如凝胶电泳，离⼼
3. 标记，如放射⾃显影
4. 核酸杂交，如 Northern/Southern blotting
5. 核酸序列测定
6. 表达蛋⽩检测，如 Western blotting
7. 表达产物活性检测，如酶活性
基因⼯程常⽤技术－⽣产
（三）表达产物的⽣产
1. ⾼密度发酵－发酵罐
2. 产物分离纯化-层析技术
6
遗传转化的
文档评论（0）