微生物课件-实验-4实验四球菌、肠道杆菌-zxy.ppt

实验四病原性球菌和肠道杆菌 一、肠道杆菌形态、培养特性及生化反应 1. 形态: 大肠杆菌、变形杆菌、痢疾杆菌 2. 培养（中国兰平板） 大肠杆菌、变形杆菌、 伤寒杆菌、乙型副伤寒杆菌、痢疾杆菌 3. 生化反应： （示） 双糖铁基培养基 尿素培养基 3. 生化反应： （示） 双糖铁基培养基 尿素培养基 尿素培养基 ★　成份：20%尿素水溶液 　 0.6%酚红溶液 ★　原理：尿素酶分解尿素产氨气 二、肠道杆菌分离鉴定步骤 1.粪便→中国兰平板 兰色、较大、不透明菌落----大肠杆菌 无色、较小，半透明菌落----致 病 菌 2.生化试验： 双糖铁基、尿素、吲哚 3.血清诊断 常见病原性球菌的种类 革兰阳性球菌 葡萄球菌 链球菌 肺炎链球菌 肠球菌 革兰阴性球菌 脑膜炎奈瑟菌 淋病奈瑟菌 金黄色葡萄球菌血平板 乙型溶血性链球菌血平板 血浆凝固酶的种类及检测方法 游离血浆凝固酶 —— 试管法检测 结合血浆凝固酶 —— 玻片法检测 游离血浆凝固酶（free coagulase) R质粒接合传递试验 供体菌：福氏痢疾杆菌 耐链霉素、氯霉素、四环素和磺胺药物 受体菌：大肠杆菌 耐利福平 培养基：中国兰平板 100μg/ml利福平；20μg/ml氯霉素 * * 肠道杆菌 双糖铁基培养基 半固体培养基 固体斜面培养基 成分： 硫酸亚铁铵 硫代硫酸钠 乳糖 酚红 H2S试验 乳糖发酵试验 成分： 琼脂(0.35%)(动力观察) 蛋白胨水 葡萄糖 酚红 葡萄糖发酵试验 A.接种大肠杆菌 B.接种痢疾杆菌 C.未接种的对照管 操作：生化反应 接 种： 1、双糖铁基 葡萄糖发酵管 2、 蛋白胨水培养基 硫酸亚铁半固体培养基 菌 株： 中国兰平板(1-8)：单号；双号 —— 致 病 菌 培养 培养 肺炎链球菌菌落－草绿色溶血环 培养 脐状菌落 肺炎链球菌 培养 可疑败血症标本的鉴定 镜下 革兰染色 10×100 血液培养 血平板培养 镜检 血浆凝固酶试验 甘露醇发酵实验 游离血浆 凝固酶 (似凝血酶原) 凝血酶样物质 血浆 协同因子 纤维蛋白原 (液态) 纤维蛋白 (固态) 金葡菌 纤维蛋白原 结 合 凝 固 酶 （菌表面纤维蛋白原受体） 血浆纤维蛋白原与细菌受体交联→细菌凝聚 1:2兔血浆 生理盐水 血浆凝固酶试验结果（玻片法） 阳性(细菌凝集) 阴性 ＋ 接 种： 1、双糖铁基 葡萄糖发酵管 2 蛋白胨水培养基 硫酸亚铁半固体培养基 菌 株： 中国兰平板(1-8)：单号；双号 —— 致 病 菌 示教 1. 血平板/血培养/甘露醇 2. 双糖铁基 3. 尿素培养基 操作：