喹诺酮类药物甲磺酸加替沙星药效学研究.docVIP

喹诺酮类药物甲磺酸加替沙星药效学研究 　　[摘要]　本文通过体外抑菌实验及体内保护实验对喹诺酮类药物甲磺酸加替沙星的药效学研究，体外抑菌主要针对金黄色葡萄球菌及铜绿假单胞菌进行测试，体内保护实验采用与加替沙星药物做对比，对其半数有效浓度的测定。结果显示，甲磺酸加替沙星的药物抑菌及体内保护均优于其前提药物加替沙星。 　　[关键词]　喹诺酮类药物；甲磺酸加替沙星；药效学研究 　　[中图分类号]R285.5　[文献标识码]A　[文章编号]1007―8517(2011)15―0048―01 　　 　　甲磺酸加替沙星是加替沙星属的第四代氟喹诺酮类抗菌药物，其为加替沙星与甲磺酸成盐制得，服用在体内分解为加替沙星药物。由于在结构上对加替沙星进行了结构修饰，因此，其在生物利用度及化学稳定性均优于传统的加替沙星药物。甲磺酸加替沙星与加替沙星药物相同，对革兰阳性菌和阴性菌均有较强的抑制作用，对厌氧菌、衣原体、支原体、军团菌、空肠弯曲菌、奈瑟菌也有较好的抗菌效果。本文根据我国抗生素类药效学实验指导原则，甲磺酸加替沙星的抗菌性能进行药效学评价。 　　 　　1、实验材料 　　 　　1.1　药物配制 　　甲磺酸加替沙星粉针剂由南京圣和药业有限公司提供，将上述药物经适当生理盐水配制成浓度为250mg?L-1的药品原液，经微孔滤膜过滤，除菌后置于－20℃的冰箱下备用。 　　 　　1.2　实验菌株 　　金黄色葡萄球菌ATCC29213、铜绿假单胞菌ATEC27853，以上菌株均从中国医学科学院菌种保存中心购得。所有菌株均在本教研室保存。 　　 　　1.3　培养基 　　肉汤培养基、MH琼脂平板、MH血平板由本实验室配制制得。厌氧液体培养基、厌氧固体培养基从上海生物制品研究所购得。5％酵母液：5g干酵母粉，用100ml蒸馏水稀释制得，4℃保存备用。 　　 　　1.4　受试动物及分组 　　健康昆明种小白鼠(CV级)170只，雌雄各半，质量在18～22g，将受试小鼠分为12组，每组10只，其中前6组供测定最小致死量使用，其余11组作为受试药品治疗组，所有小鼠受试前12h，禁食不禁水。 　　 　　1.5　统计学方法 　　患者数据资料采用SPSS统计软件进行统计学处理及分析，计量资料采用t检验，计数资料采用X2检验，检验标准P0.05。 　　 　　2、实验方法 　　 　　2.1　体外抑菌实验 　　将实验药物与阳性对照药物按一定比例稀释至5mg?L-1至125mg?L-1不同药物浓度。其中对照管中不加入药物。将细菌进行培养后，用培养基稀释至107CFU?ml-1，分别接种至试验药物与阳性对照管中(共29管)，接种量为5×105CFU?ml-1，试管置培养箱内37℃培养24h后抑制细菌肉服可见生长的最低药物浓度为该药对该细菌的最小抑菌浓度。 　　测出最小抑菌浓度后，将最小抑菌浓度向前的推进4个浓度分别吸取0.1ml，均匀涂布琼脂平板上，每个浓度涂2个板，试管置培养箱内37℃培养24h后平板菌落数少于5个的最小稀释度的药物浓度即为最小杀菌浓度。 　　 　　2.2　体内保护实验 　　取受试健康昆明种小鼠60只，用肉汤培养铜绿假单胞菌及金黄色葡萄球菌，24h后，用5％酵母液稀释成不同浓度，分别对10只小鼠进行腹腔注射，每只小鼠注射剂量为0.5ml，24h内观察其死亡情况，并计算其最小致死量，另取2组小鼠，重复该实验。将三次获得数据取平均值。 　　测定其最小致死浓度后，根据最小致死浓度将甲磺酸加替沙星用生理盐水配成5种质量浓度，过滤除菌后备用，并取同浓度的加替沙星作为阳性对照。 　　将11组小鼠分为给药组(1～10组)及对照组(第11组)，全部腹腔注射全部腹腔注射金葡菌液或铜绿假单胞菌，每只注射量为0.5ml。之后，将1～5组小鼠用5种浓度的甲磺酸加替沙星进行治疗，6～10组采用加替沙星作为对照治疗，第11组不予以给药。治疗组采取灌胃给药的形式，每6h进行一次灌胃，每次0.5ml。连续给药观察7d，记录每天每组小鼠死亡数，并计算半数有效浓度。采用95％可信限对给药效果进行评价。 　　 　　3、结果 　　 　　体外抑菌实验结果表明，甲磺酸加替沙星对金黄色葡萄球菌及铜绿假单胞菌的最小抑菌浓度为浓度为0.062mg?L-1及1.400mg?L-1。体内保护实验结果表明，实验药甲磺酸加替沙星金黄色葡萄球菌对昆明种小白鼠的最小致死浓度为3.75×107CFU?ml，铜绿假单胞菌对昆明种小白鼠为9.03×106CFU?ml。在半数有效浓度的测定中，甲磺酸加替沙星对金黄色葡萄球菌和铜绿假单胞菌的半数有效浓度分别为3.01 mg?kg-1和8.41mg?kg-1，加替沙星对金黄色葡萄球菌和铜绿假单胞菌的半数有效浓度分别为2.