荧光定量PCR技术在临床检测中的应用().ppt

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荧光定量PCR技术在临床检测中的应用()

甲型H1N1流感 流行性感冒简称流感,是由甲、乙、丙三种流感病毒引起的急性呼吸道传染病。甲型流感病毒根据其表面(H和N)结构及其基因特性的不同又可分成许多亚型,至今甲型流感病毒已发现的血凝素有16个亚型(H1-H16),神经氨酸酶9个亚型(N1-N9)。 * “猪流感”更名为“甲型H1N1流感” 世界卫生组织4月30日宣布,从当日起,该组织不再使用“猪流感”一词指代当前疫情,而开始使用“A(H1N1)型流感”一词。与之相对应,我国的官方文件从5月1日起相继用“甲型H1N1流感”代替原来的“人感染猪流感”。 世界卫生组织发言人说,之所以更改叫法,是因为“猪流感”一词容易误导消费者,美国和墨西哥等国的猪肉及猪肉制品已明显受到其他国家进口禁令影响。 世界卫生组织的声明说,根据目前掌握的科学依据,此次流行的病毒仅在人际间传播,尚无证据表明它在猪群内传播,或由猪向人传播,也无证据表明人因食用猪肉或相关产品染病。 * 病 原 学 甲型H1N1流感病毒属于正粘病毒科,典型病毒颗粒呈球状,直径为80 nm~120 nm,有囊膜。囊膜上有许多放射状排列的突起糖蛋白,分别是血凝素HA、神经氨酸酶NA 和M2蛋白。病毒颗粒内为核衣壳, 呈螺旋状对称, 直径为10nm。甲型H1N1流感病毒为单股负链RNA 病毒,基因组约为13.6 kb,由大小不等的8 个独立片段组成。 * * 流行病学特点 传染源 主要为病猪和携带病毒的猪,感染猪流感病毒的人也被证实可以传播病毒。感染这种病毒的动物均可传播。 传播途径 主要为呼吸道传播,也可通过接触感染的猪或其粪便、周围污染的环境或气溶胶等途径传播。某些毒株如H1N1可在人与人之间传播,其传染途径与流感类似,通常是通过感染者咳嗽或打喷嚏等。 * 易感人群 普遍易感。患者多数年龄在25岁至45岁之间,目前报道以青壮年为主,应注意老人和儿童。 * 临床表现 潜伏期一般1至7天左右,较流感、禽流感潜伏期长。 人感染甲型H1N1流感后的早期症状与普通人流感相似,包括发热、咳嗽、喉痛、身体疼痛、头痛、发冷和疲劳等,有些还会出现腹泻或呕吐、肌肉痛或疲倦、眼睛发红等。 * 部分患者病情可迅速进展,来势凶猛、突然高热、体温超过39℃,甚至继发严重肺炎、急性呼吸窘迫综合征、肺出血、胸腔积液、全血细胞减少、肾功能衰竭、败血症、休克及Reye综合征、呼吸衰竭及多器官损伤,导致死亡。 * 实验室检查 外周血象:白细胞总数一般不高或降低。重症患者多有白细胞总数及淋巴细胞减少,并有血小板降低; 血清学诊断:可使用间接ELISA、抗原捕捉ELISA、荧光免疫法等; 反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR):由于PCR技术具有简便、快速、灵敏、特异性强等特点,已用于猪流感病毒基因的检测和分子流行病学调查等; * 4 病毒分离:从患者呼吸道标本中(咽拭子、口腔含漱液、鼻咽或气管吸出物、痰或肺组织)分离甲型H1N1流感病毒。常用的方法有鸡胚接种法和细胞培养法。现有的诊断方法中,病毒分离法是较敏感的,但需要2-3周时间。 * 人感染猪流感的诊断标准 医学观察病例:曾到过甲型H1N1流感疫区,或与病猪及甲型H1N1流感患者有密切接触史,1周内出现流感临床表现者。列为医学观察病例者,对其进行7天医学观察(根据病情可以居家或医院隔离)。 * 2 疑似病例:曾到过疫区,或与病猪及甲型H1N1流感患者有密切接触史(也可流行病学史不详),1周内出现流感临床表现,呼吸道分泌物、咽试子、痰液、血清H亚型病毒抗体阳性或核酸检测阳性。 * 临床诊断病例:被诊断为疑似病例,且与其有共同暴露史的人被诊断为确诊病例者。 确诊病例:从呼吸道标本或血清中分离到特定病毒;RT-PCR对上述标本检测,有甲型H1N1病毒RNA存在,经过测序证实,或两次血清抗体滴度4倍升高,可确诊为人感染甲型H1N1流感。 * 四 TORCH感染特点与检测 TOX : Toxoplasma? gondii RV: Rubella virus CMV: Human cytomegalovirus HSV: Herpes simplex virus TORCH * TORCH感染特点    1. 母-胎传播的主要病原体    2. 引起胎儿畸形新生儿缺陷的重要原因    3. 自然状态下呈隐性感染    4. 怀孕、多次输血、AIDS等易发生显性感染 5. 可致多发性、全身性感染    6. 只有风疹可获得长久的免疫力,可用疫苗预防 TORCH * (一) 弓形虫感染与致病 滋养体如弓形

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