定量PCR介绍幻灯片.pptVIP

定性分析应用例 对人的ALDH2基因进行SNP解析 检测方法 Cycling Probe法 SNP 位点 ALDH2 type1和ALDH2 type2 (G/A) 使用试剂 Cycleave PCR? Core Kit (DCY501) 使用仪器 Thermal Cycler Dice? Real Time System (TP800) 实验背景 Aldehyde dehydrogenase-2（ALDH2）基因位于人类第12对 染色体q24位置，有ALDH2 type1和ALDH2 type2两种基因型， 其两种基因型序列的差别在exon12第487个氨基酸位置， ALDH2 type1型为Glu(GAA), ALDH2 type2型为Lys(AAA)。 实时荧光定量PCR介绍 * * SNP解析原理示意图 实时荧光定量PCR介绍 * * Cycling Probe法 PCR-RFLP法 ROX FAM ROX、FAM通道均有信号检出 Eco57 I CTGAAG(N)16 GACTTC(N)14 wild type :切断 Mutant type :不切断 ROX FAM Mutant wild ROX通道有信号检出 FAM 通道检出荧光信号 ROX FAM 杂合型 (hetero) 野生型 (wild homo) 突变型 (mutant