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(3)在微生物的培养过程中,实验室对培养基灭菌常用的方法是高压蒸汽灭菌法。为防止冷凝水影响细菌的生长,需将培养皿倒置培养。一定区域内同种生物的全部个体称为一个种群。 答案:(1)盐(或NaCl) 选择 (2)未接种的培养基 未加高浓度盐的培养基 (3)高压蒸汽灭菌 倒置 种群 3.(2015·全国卷Ⅰ节选)已知微生物A可以产生油脂,微生物B可以产生脂肪酶。脂肪酶和油脂可用于生物柴油的生产。回答有关问题: (1)显微观察时,微生物A菌体中的油脂通常可用____________染色。微生物A产生的油脂不易挥发,可选用____________(填“萃取法”或“水蒸气蒸馏法”)从菌体中提取。 (2)为了从自然界中获得能产生脂肪酶的微生物B的单菌落,可从含有油料作物种子腐烂物的土壤中取样,并应选用以____________为碳源的固体培养基进行培养。 (3)为了确定微生物B产生的脂肪酶的最适温度,某同学测得相同时间内,在35℃、40℃、45℃温度下降解10 g油脂所需酶量依次为4 mg、1 mg、6 mg,则上述三个温度中,________℃条件下该酶活力最小。为了进一步确定该酶的最适温度,应围绕________℃设计后续实验。 【解析】(1)脂肪可被苏丹Ⅲ(Ⅳ)染液染成橘黄色(红色),题干中说明微生物A产生的油脂不易挥发,则可以采用萃取法提取微生物A中的油脂。 (2)油脂为有机化合物,富含碳元素,故为了从自然界获得能够分解油脂的单菌落,应以油脂为唯一碳源来配制培养基。在该培养基上,能分解油脂的微生物可以正常生长,其他微生物不能正常生长。 (3)在45℃下,降解10 g油脂所需酶量最多,则该温度下酶活性最低;由题干信息可知,40℃下降解10 g油脂所需的酶量最少。应围绕40℃设置不同温度梯度来探究酶的最适温度。 答案:(1)苏丹Ⅲ(或苏丹Ⅳ) 萃取法 (2)油脂(其他合理答案也可) (3)45 40 4.(2014·全国卷Ⅱ)为了调查某河流的水质状况,某研究小组测定了该河流水样中的细菌含量,并进行了细菌分离等工作。回答下列问题: (1)该小组采用稀释涂布平板法检测水样中细菌含量。在涂布接种前,随机取若干灭菌后的空白平板先行培养了一段时间,这样做的目的是_____________; 然后,将1 mL水样稀释100倍,在3个平板上用涂布法分别接入0.1 mL稀释液;经适当培养后,3个平板上的菌落数分别为39、38和37,据此可得出每升水样中的活菌数为________。 (2)该小组采用平板划线法分离水样中的细菌。操作时,接种环通过__________灭菌,在第二次及以后的 划线时,总是从上一次划线的末端开始划线,这样做的目的是_____________________________。 (3)示意图A和B中,________表示的是用稀释涂布平板法接种培养后得到的结果。 (4)该小组将得到的菌株接种到液体培养基中并混匀,一部分进行静置培养,另一部分进行振荡培养。结果发现:振荡培养的细菌比静置培养的细菌生长速度快。分析其原因是:振荡培养能提高培养液中__________的含量,同时可使菌体与培养液充分接触,提高________的利用率。 【解题指南】(1)题干关键词:“先行培养”“振荡培养”。 (2)隐含信息:A图中菌落是采用平板划线法接种培养的结果,B图中菌落分布相对均匀,为稀释涂布平板法接种培养的结果。 (3)关键知识:稀释涂布平板法检测细菌含量、平板划线法分离细菌。 【解析】本题考查微生物培养、细菌分离及计数等相关知识。 (1)为了确定培养基的灭菌是否合格,微生物学实验一般会设置空白对照:随机取若干灭菌后的空白平板培养一段时间,观察培养基上是否有菌落生成;利用平板菌落计数法的计算公式估算水样中的活菌数: (2)接种时接种环需要灼烧灭菌;在第二次及以后划线时,总是从上一次划线的末端开始,这样做的目的是通过划线次数的增加,使每次划线时菌体的数目逐渐减少,以便得到单个菌落。 (3)根据示意图A和B中生长的菌落形态,判定B图为稀释涂布平板法接种培养的结果(菌落分布相对均匀)。 (4)振荡培养可以增加液体培养基溶解氧的含量,促进好氧型微生物的生长;另外振荡培养还可以使菌体与培养液充分接触,提高营养物质的利用率。 答案:(1)检测培养基平板灭菌是否合格 3.8×107 (2)灼烧 将聚集的菌体逐步稀释以便获得单个菌落 (3)B (4)溶解氧 营养物质 【易错提醒】本题第(1)题第2空易错答为3.8×104。出错原因是忽视了单位,教材计算公式是每克样品中的细菌数,而本题要计算每升水样中的活菌数,应再乘以103。 考点三 分解纤维素的微生物的分离 核心知识回顾 1.纤维素与纤维素酶: (1)纤维素:一种由_______首尾相连而成的高分子化 合物,是地
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