毛细管电泳技术与药物分析.docVIP

PAGE PAGE 2 毛细管电泳技术与药物分析 专业 班级 姓名 学号 毛细管电泳技术与药物分析 1.概述 毛细管电泳(capillary electrophoresis，CE)又称高效毛细管电泳(HPCE)或毛细管分离法(CESM)是以高压直流电场为驱动力，内径为25一100μm的弹性石英熔融毛细管柱内荷电粒子按其淌度(mobility)或迁移速度 (migrationvelocity)的差异而实现分离的一类液相分离技术。CE迅速发展于20世纪80年代中后期，可以说是经典电泳技术与现代微柱分离技术完美结合的产物，是分析科学中继气相色谱 (gaschromatography)和高效液相色谱(high performance liquid chromatography，HPLC)之后的又一重大进展，它使分析科学得以从微升水平进入纳升水平，并使细胞分析乃至单分子分析成为可能，并被认为是当代分析科学最具活力的前沿研究课题。CE具有分离效能高、分析速度快、样品用量少、分析对象广，多模式化和环保等特点，已成为一种重要的分离分析手段，在生物、医药、化工、环保、食品等领域具有广阔的应用前景。 2. 毛细管电泳在药物分析中的有关应用 毛细管电泳的药物分析大致可分为三部分：一是原药的定量，原药中杂质的测定、药剂的分析以及对它们的稳定性的评价等以药品质量管理为目的的测试方法。二是对进入人体内的药物或代谢物的吸收、分布、代谢、排泄等体内动态的研究，即临床药物分析。三是手性药物的分离分析。 采用CE作为药物分离的手段，首先需要判断分析对象的存在状态，以离子形态存在的样品，一般选择毛细管区带电泳(CZE)分离模式,而非离子状态的样品则选择MECC分离模式。这两种分离模式都难以达到满意结果时，就有必要考虑在泳动电解液中加入一些能与样品产生相互作用的添加剂，如环糊精或有机溶剂。在泳动电解液中添加适当的修饰剂使分离效果得到改善也是CE分析的主要特征之一。 手性化合物，是其化合物结构具有左右对称的性质。它们的化学、物理性质非常相似。手性化合物尤其是手性药物对映体的分离分析具有非常重要的意义，已成为分析化学领域中广泛研究的课题之一。 2.1. 毛细管电泳技术在中药分析中的应用 2.1. 1 中草药分析的重要意义 中草药分析即对中草药进行质量控制，是选择中草药中具有生理活性的主要化学成分作为标志物，建立其含量测定方法，评价药物的内在质量，衡量其产品质量是否达到要求和稳定。中草药是中医防病治病的物质基础，也是中华民族独具特色，有潜在源头。 2.1.2 生物碱类 生物碱类成分广泛分布于植物如防己科、麻黄科和毛茛科等，是一类有显著生理活性的药物成分。生物碱在缓冲体系中大多带有部分正电荷，一般可用毛细管区带电泳（CZE）模式，在一定的pH值下实现分离，有时可加入乙腈、甲醇等有机溶剂以改善电泳流和选择性。 2.1.3 蒽醌类 蒽醌类化合物结构中多有羟基和羧基，用CZE和胶束电动毛细管色谱（MECC）都能分析。张艳等采用MECC分离模式测定瞿黄液中大黄素、大黄酚、大黄酸和大黄素甲醚的含量。以对氨基苯磺酸为内标，缓冲液为0.05mol/L SDS、0.1mol/L Tris、0.03mol/L磷酸氢二钠（pH=8.2），温度为25℃，恒定电压25kV，检测波长254nm，结果表明该方法的精密度、线性关系和回收率均较好。 2.1.4 黄酮类 黄酮类成分的基本结构单元为4-苯基苯并吡喃酮。其衍生物如甲基化产物，羟甲基化产物和糖苷广泛的存在于各种植物中。黄酮类化合物一般不带电，多用MECC模式分离测定，也可以利用黄酮类化合物含有邻羟基，可与硼砂复合成带电粒子，再用CZE分离模式。宋秀荣、杨更亮等用高效毛细管电法测定桑叶中的有效成分在熔硅毛细管（58.2cm×75μm，有效长度50.6cm）柱上，以0.02mol/L硼砂混合缓冲液（pH=8.60）作电解质，电压为20kV，温度30℃，真空进样5s，于254nm处紫外检测，有良好的线性关系，r=0.998，槲皮素、紫槲皮苷和绿原酸的色谱峰达到完全分离。 2.1.5 有机酸类 有机酸类成分解离后带负电荷，以CZE模式分析时，在中性成分后出峰，分析时间较长。王德先、赵敬湘等以10mmol/L的硼酸盐与19mmol/L的磷酸盐＋10%乙醇的混合液作为缓冲溶液，pH值在8.86的条件下，测定金银花中有效成分绿原酸的含量，结果绿原酸在0.236～2.008μg/ml范围内呈线形关系，绿原酸含量为2.32%， RSD=2.98%（n=5），效果较好。 2.1.6 皂苷类 皂苷类化合物不带电荷，一般采用MECC分离