小麦蓝矮植原体免疫膜蛋白(Imp)基因克隆和分子特性分析.pdfVIP

中国农业科学 2008,41(2):405-411 Scientia Agricultura Sinica 小麦蓝矮植原体免疫膜蛋白（Imp） 基因的克隆和分子特性分析 1，2 1 1 1 顾沛雯 ，吴云锋 ，王海妮 ，安凤秋 1 （西北农林科技大学植物保护学院与陕西省农业分子生物重点实验室/植保资源与病虫害教育部重点实验室，陕西杨凌 712100 ； 2 宁夏大学农学院，银川 750100 ） 摘要：【目的】探讨小麦蓝矮植原体免疫膜蛋白在介体-病原-寄主互作的分子机理。【方法】通过植原体免疫 膜蛋白基因序列两侧的保守区设计引物对Imp 1051/Imp 2265，用PCR方法扩增小麦蓝矮植原体免疫膜蛋白基因； 对扩增片段的最大开放阅读框和基因的同源矩阵、系统发育树分析；对克隆基因所编码蛋白进行跨膜区、亲疏水 区和前导信号序列分析。【结果】从小麦蓝矮病病株和接种长春花中均扩增到约 1.0 kb 的特异片段，其中小麦蓝 矮植原体免疫膜蛋白基因长 495 bp，推导的编码蛋白含有 164 个氨基酸。与 10 种植原体的免疫膜蛋白基因进行 序列同源性分析，小麦蓝矮与三叶草绿变植原体同源性最高，核苷酸和编码的氨基酸序列的同源率分别为98.4％ 和95.1％。蛋白质结构分析结果表明：小麦蓝矮免疫膜蛋白N端有一个跨膜的前导信号序列，C端为跨膜锚定区， 中间为膜外亲水区。【结论】小麦蓝矮植原体与三叶草绿变、翠菊黄化、洋葱黄化和泡桐丛枝植原体的免疫膜蛋白 为同型蛋白。 关键词：小麦蓝矮植原体；免疫膜蛋白基因；同源性；蛋白结构 Clone and Molecular Characterization of Immunodominant Membrane Protein Gene from Wheat Blue Dwarf Phytoplasma 1, 2 1 1 1 GU Pei-wen , WU Yun-feng , WANG Hai-ni , AN Feng-qiu 1 ( College of Plant Protection and Shaanxi Key Laboratory of Molecular Biology for Agriculture/Key Laboratory of Plant Protection Resources and Pest Management, Ministry of Education, Northwest Agriculture and Forest University, Yangling 712100, Shaanxi, 2 Province ; Agricultural College, Ningxia University, Yinchuan 750100) Abstract: 【Objective 】The aim of the experiment is to get the basic molecular information of the mechanism of vector-pathogen-host plant relationships.【Method 】DNA was extracted from the infected wheat and periwinkle samples and the target