胶原／壳聚糖复合纳米纤维膜引导骨再生的细胞学研究-中国生物医学.PDF

３７ 卷 １ 期 中　 国　 生　 物　 医　 学　 工　 程　 学　 报 Ｖｏｌ． ３７　 Ｎｏ． １ ２０１８年２月 Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｂｉｏｍｅｄｉｃａｌ Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ Ｆｅｂｒｕａｒｙ　 ２０１８ 胶原／ 壳聚糖复合纳米纤维膜引导骨再生的细胞学研究 １，２ １ １∗ ３ １ 李晓静 　 高　 波 　 董　 研 　 苟中入 　 苗滪汶 １（浙江大学医学院附属第二医院口腔矫形科，杭州　 ３１０００９） ２ （浙江大学医学院附属儿童医院口腔科，杭州　 ３１０００６） ３ （浙江大学浙江加州国际纳米技术研究院，杭州　 ３１００２９） 摘　 要：采用静电纺丝技术制备胶原／ 壳聚糖复合纳米纤维膜，研究其作为引导骨再生生物膜的细胞生物相容性 及诱导成骨性。 以乙酸为溶剂，聚环氧乙烯（ＰＥＯ）为增塑剂，采用静电纺丝技术制备胶原纳米纤维膜及不同比例 的胶原／ 壳聚糖复合纳米纤维膜（胶原、壳聚糖、ＰＥＯ质量比５∶１∶４，５∶２∶３，５∶４∶１），电子显微镜观察４种纳米纤维膜 的表面形态；将骨髓间充质干细胞种植于胶原纳米纤维膜及表面形态较好的胶原／ 壳聚糖纳米纤维膜上，通过ＭＴＴ 法、碱性磷酸酶检测、细胞内胶原检测、免疫荧光染色及茜素红染色法观察，研究其细胞生物相容性及诱导成骨性。 扫描电子显微镜观察胶原纳米纤维膜及质量比为５∶１∶４的胶原／ 壳聚糖复合纳米纤维膜的纤维光滑，直径均一。 ＭＴＴ法检测显示，胶原纳米纤维膜和胶原／ 壳聚糖复合纳米纤维膜均可促进骨髓间充质干细胞的粘附和增殖。 细 胞培养１４ ｄ后，胶原／ 壳聚糖复合纳米纤维膜上细胞内胶原含量检测为２０２ ｍｇ／ ｇｐｏｒｔ，高于胶原纳米纤维膜组的 １６３ ｍｇ／ ｇｐｏｒｔ胶原含量（Ｐ＜００５），且胶原／ 壳聚糖复合纳米纤维膜上细胞内碱性磷酸酶、骨钙素及钙化结节的形 成均高于胶原纳米纤维膜组。 胶原／ 壳聚糖复合纳米纤维膜可促进骨髓间充质干细胞的增殖和分化，有望应用于 骨再生的研究。 关键词：静电纺丝；胶原；壳聚糖；纳米纤维；骨再生 中图分类号：Ｒ３１８　 　 文献标志码：Ａ　 　 文章编号：０２５８⁃８０２１（２０１８）０１⁃００７９⁃０７ Ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ Ｅｌｅｃｔｒｏｓｐｕｎ Ｃｏｌｌａｇｅｎ／ Ｃｈｉｔｏｓａｎ Ｃｏｍｐｏｓｉｔｅ Ｎａｎｏｆｉｂｒｏｕｓ Ｍｅｍｂｒａｎｅ ｏｎ Ｏｓｔｅｏｇｅｎｅｓｉｓ ｆｏｒ Ｂｏｎｅ Ｒｅｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ １，２ １ １∗ ３ １ Ｌｉ Ｘｉａｏｊｉｎｇ 　 Ｇａｏ Ｂｏ 　 Ｄｏｎｇ Ｙａｎ 　 Ｇｏｕ Ｚｈｏｎｇｒｕ 　 Ｍｉａｏ Ｙｕｗｅｎ １ （Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ ｏｆ Ｐｒｏｓｔｈｅｔｉｃ Ｄｅｎｔｉｓｔｅｙ，ＳｅｃｏｎｄＡｆｆｉｌｉａｔｅｄ Ｈｏｓｐｉｔａｌ，Ｃｏｌｌｅｇｅ ｏｆ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ， Ｚｈｅｊｉａｎｇ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｈａｎｇｚｈｏｕ３１０００９，Ｃｈｉｎａ） ２ （Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ ｏｆ Ｓｔｏｍａｔｏｌｏｇｙ，Ｃｈｉｌｄｒｅｎ′ｓ Ｈｏｓｐｉｔａｌ，Ｃｏｌｌｅｇｅ ｏｆ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ，Ｚｈｅｊｉａｎｇ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｈａｎｇｚｈｏｕ３１０００６，Ｃｈｉｎａ） ３（Ｚｈｅｊｉａｎｇ⁃Ｃａｌｉｆ