GB/T 17999.3-1999SPF鸡　血清平板凝集试验.pdf

GR/r17999.3-1999 前 言 本标准参照农业部1992年版 鸡《白痢一鸡伤寒沙门氏菌多价染色平板凝集抗原与阴、阳性血清制备 及检验规程》编制而成 SPFx鸟微生物学质量控制国家系列标准，包括SPF鸡微生物学监测总则和9种SPF鸡微生物学检 测方法 本标准为S《PF鸡 血清平板凝集试验》。 SPF鸡微生物学检测方法还包括以下部分: GB/T17999.11999 SPF鸡 红细胞凝集抑制试验; GB/T17999.2 1999SPF鸡 血清中和试验; GB/T17999.4-1999 SPF鸡 琼脂扩散试验; GB/T17999.5一1999SPF鸡 酶联免疫吸附试验; GB/T17999.6-1999SPF鸡 胚敏感试验; GB/T17999.7--1999SPF鸡 鸡白痢沙门氏菌检验; GB/T17999.5-1999SPF鸡 试管凝集试验; GB/T17999.9--1999SPF鸡 间接免疫荧光试验。 本标准由中华人民共和国农业部、国家科学技术部提出。 本标准由农业部畜牧兽医司归口 本标准起草单位:中国兽药监察所、农业部实验动物研究中心。 本标准主要起草人:张学琴、陈德威、赵立红。 中华人民共和 国国家标准 GB/r17999.3-1999 SPF鸡 血清平板凝集试验 SPFchicken一Serumplateagglutinationtest 1 范围 本标准规定了鸡血清平板凝集试验所用试剂、材料，操作程序及结果判定等。 本标准适用于SPF鸡感染以下病原菌后的凝集抗体的监测:鸡白痢沙门氏菌(Salmonellapullo- ，一:an),鸡毒支原体(Mycoplasmagallisepticum),滑液囊支原体(Mycoplasma.synoviae),MIJ鸡嗜血杆菌 (Haemophilusparagallinarum), 2 原理 血清平板凝集试验是细菌性抗原与相应的抗体结合后，在适量的电解质参与下，经过一段时间出现 肉眼可见的凝集现象 常采用已知的标准细菌性抗原液检测相应的凝集抗体。 3 试剂和材料 31 试剂 3.1.1 凝集抗原。 3.1.2 阴性、阳性血清 3.1.3 被检血清。 3.2 材料 3.2.1 玻璃板。 3.2.2 移液器(TD10川-200阿)及吸头 4 操作程序 4.1使用前10min-20min自冰箱取出抗原、阴性或阳性血清与被检血清，使其达到室温。 4.2 用移液器吸取充分混匀的诊断抗原一滴(。025ml_一。05ml)，垂直滴于玻璃板上，然后迅速在 杭原旁边滴加同量的被检血清一滴((0.025mL-0.05mL) 4.3 用牙签使血清与抗原混合均匀，涂布成直径为1cm-2cm的片状，不断摇动玻璃板，2min内观 察结果。 4.4 试验应在20C一25C条件下进行。 4.5 每批试验应设阳性血清与阴性血清对照 5 结果判定 在2min内出现5000(++)以上凝集者为阳性，2min内不凝集(一)者为阴性，介于上述两者之间 为叮凝，凝集判读标准见表1。 国家质量技术监督局1999一11一10批准 2000一04一01实施 GB/T17999.3-1999 表 1 血清平板凝集试验判读标准 类 别 平 板 所 见 结 果 判 定 I 出现大的凝集块，底质清亮，即10o%凝集 +十 十+ z 出现明显凝集块，底质稍有混浊，即75%凝集 + 斗+ 阳性 3 出现可见的凝集颗粒，底质混浊，即50%凝集 + + 底质极混浊