GB/T 19540-2004饲料中玉米赤霉烯酮的测定.pdf

ICS 65.120 B 46 荡黔 中 华 人 民 共 和 国 国 家 标 准 GB/T 19540-2004 饲料中玉米赤霉烯酮的测定 Determination ofzearalenonein feeds 2004-06-10发布 2004-10-01实施 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局 发 布 中 国 国家 标 准 化 管 理 委 员 会 GB/T19540-2004 IN 舌 本标准参考国内外有关标准、文献，经研究、改进和验证后制定。本标准非等效于AOAC(美国公 职分析化学家协会)1988年最后通过的玉米中玉米赤霉烯酮的薄层色谱法和 1994年首次通过的玉米、 大麦、饲料中玉米赤霉烯酮的酶联免疫吸附测定法。其中薄层色谱测定方法为仲裁方法，酶联免疫吸附 测定方法为快速筛选方法。 本标准由全国饲料工业标准化技术委员会提出 本标准由全国饲料工业标准化技术委员会归口。 本标准由江苏省微生物研究所负责起草。 本标准主要起草人:毖晓黎、丁贵平、李利东、袁建兴、成恒篙. GB/T 19540-2004 饲料中玉米赤霉烯酮的测定 范围 本标准规定了玉米赤霉烯酮(zearalenone，以下简称ZEN)的薄层色谱测定方法和酶联免疫吸附测 定法 。 本标准适用于配合饲料和饲用谷物原料中ZEN的测定。 薄层色谱测定方法的最低检测量为20ng,酶联免疫吸附测定方法的最低检测量为。.25ng, 2 规范性引用文件 下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有 的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究 是否可使用这些文件的最新版本 凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。 GB/T6682 分析实验室用水规格和试验方法 GB/T 14699.1 怕料果样古洛 薄层 色谱 法 (仲裁法) 3.1 原理 试样中ZEN用三氯甲烷提取，提取液经液一液萃取、浓缩，然后进行薄层色谱分离，限量定量，或用 薄层扫描仪测定荧光斑点的吸收值，外标法定量。 3.2 试剂与材料 所用试剂除另有规定，均使用分析纯试剂 水符合GB/T6682中一级水的规定。 3.2.1 三氯甲烷。 3.2.2 40g/L氢氧化钠溶液:称取4g氢氧化钠，加水适量溶解，用水稀释至100m工。 3.2.3 磷酸溶液((1+10). 3.2.4 磷酸溶液(1+19)。 3.2.5 无水硫酸钠:650℃灼烧4h，冷却后贮于干燥器中备用。 3.2.6 展开剂 :三氛 甲烷一丙酮一苯一乙酸 (18+2+8+功 。 3.2.7 显色剂:20g抓化铝(AIC1,·6H20)溶于100mL乙醇中 3.2.8 薄层板:称取4g硅胶G,置于乳钵中加 10mL0.5 放甲基纤维素钠水溶液研磨至糊状。立即 倒人薄层板涂布器内制备成 10cmX20cm、厚度 。.3mm的薄层板，在空气中干燥后，用甲醇预展薄层 板至前沿，吹干，标记方向，在 1050C-110℃活化 1h，置于干燥器内保存备用。 3.2.9 ZEN标准储备溶液 普 告 : 工 凡接触ZEN的容器，需浸人4%次氯酸钠(NaOCI)溶液，半天后清洗备用。 2 为了安全，分析人员操作时要带上医用乳胶手套。 称取适量的ZEN标准品，用甲醇配制成约 100pg/mLZEN标准储备溶液。避光，于一5℃以下 储存 。 标定储备液的浓度，用 1cm石英比色杯，以甲醇为参比，在ZEN的最大吸收峰波长314n